发明名称 |
一种小鼠甲状腺上皮细胞分离及培养方法 |
摘要 |
本发明提供一种小鼠甲状腺上皮细胞分离及培养方法,包括步骤:(a)腹腔注射戊巴比妥钠处死小鼠,酒精消毒后取出与气管相连的小鼠甲状腺组织,置于预冷无菌含双抗的PBS缓冲液中浸泡洗涤,并剥离甲状腺组织;(b)机械解离甲状腺组织后,预热混合酶液震荡消化30-40min,Ficoll分离甲状腺单个核细胞,离心获取细胞沉淀;(c)混合完全培养基重悬细胞沉淀,接种于处理后的细胞瓶中,差速贴壁法获得甲状腺上皮细胞;(d)混合完全培养基培养纯化后的甲状腺上皮细胞。本发明提供的小鼠甲状腺上皮细胞分离及培养方法可获得产量高、纯度高且生存时间较长的小鼠甲状腺上皮细胞。 |
申请公布号 |
CN106609259A |
申请公布日期 |
2017.05.03 |
申请号 |
CN201510702243.4 |
申请日期 |
2015.10.23 |
申请人 |
江苏齐氏生物科技有限公司 |
发明人 |
张清;蒋敏;张亚洲;齐来俊 |
分类号 |
C12N5/071(2010.01)I |
主分类号 |
C12N5/071(2010.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种小鼠甲状腺上皮细胞分离及培养方法,其特征在于,包括步骤:(a)腹腔注射戊巴比妥钠处死小鼠,酒精消毒后取出与气管相连的小鼠甲状腺组织,置于预冷无菌含双抗的PBS缓冲液中浸泡洗涤,并剥离甲状腺组织;(b)机械解离甲状腺组织后,预热混合酶液震荡消化30‑40min,Ficoll分离甲状腺单个核细胞,离心获取细胞沉淀;(c)混合完全培养基重悬细胞沉淀,接种于处理后的细胞瓶中,差速贴壁法获得甲状腺上皮细胞;(d)混合完全培养基培养纯化后的甲状腺上皮细胞。 |
地址 |
214400 江苏省江阴市东盛西路6号A7楼1单元(扬子江生物医药加速器) |