GFP-Addnd 3’UTR重组表达载体及其构建方法与应用

摘要

本发明公开了一种GFP‑Addnd 3’UTR重组表达载体，其载体为表达载体pCS²⁺，其上连接有达氏鲟dnd基因的3’UTR片段和绿色荧光蛋白编码区基因。本发明的GFP‑Addnd3’UTR重组表达载体可以用于标记达氏鲟原始生殖细胞，具体标记方法为：体外合成GFP‑Addnd 3’UTR重组表达载体的mRNA，然后通过显微注射的方式注入达氏鲟胚胎发育1‑cell期的胚胎中，然后进行孵化培养，并实时观察不同发育时期绿色荧光蛋白的表达情况。由于Addnd为母源性的基因，且仅在卵巢和精巢中表达，因此，采用本发明的标记方法后，在受精卵发育过程中可检测到绿色荧光蛋白的表达，从而有利于跟踪原始生殖细胞的迁移发育和进一步深入的科学研究。

主权项

一种GFP‑Addnd 3’UTR重组表达载体，其特征在于：其载体为表达载体pCS²⁺，其上连接有达氏鲟dnd基因的3’UTR片段和绿色荧光蛋白编码区基因；所述达氏鲟dnd基因的3’UTR片段的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；所述绿色荧光蛋白编码区基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。