秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法

摘要

本发明提供一种秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，包括外植体选择与消毒、获得无菌试管苗、胚状体诱导培养、胚状体壮苗培养和炼苗与移栽等步骤。本发明有效解决了秋枫工厂化育苗的问题，具有培养时间短，繁殖系数高，成活率高，植株健壮等优点，可满足市场对秋枫种苗的需求。

主权项

一种秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：A、将秋枫种子用2％的洗洁精水溶液浸泡5min后，线状自来水冲洗15‑20min，再用添加了2‑3滴100mg/L吐温20的0.1％的升汞溶液浸泡消毒8‑10min，无菌水冲洗3‑5次，最后用消毒滤纸去除所述秋枫种子表面水分，得消毒外植体；B、将步骤A中得到的所述消毒外植体接种到第一培养基中，于22‑26℃、光照条件下培养35天，得无菌试管苗，其中，所述第一培养基包括MS培养基，0.1‑0.5mg/L赤霉素，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂，所述光照条件为，光照强度1500lux，光照时间8‑10h/天；C、将步骤B中得到的所述无菌试管苗的子叶置于第二培养基中，于22‑26℃、所述光照条件下培养30天，得胚状体，其中，所述第二培养基包括MS培养基，0.5‑2.0mg/L NAA，0.1‑0.5mg/L KT，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂；D、将步骤C中得到的所述胚状体置于第三培养基中，于22‑26℃，所述光照条件培养30天，得完整带根健壮植株，其中，所述第三培养基包括MS培养基，0.5‑1.5mg/L 6‑BA，0.1‑0.5mg/L NAA，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂；E、在所述步骤D中获得所述完整带根健壮植株后，向所述第三培养基中加入少量自来水，敞口放置2‑4天后，将所述完整带根植株取出，洗净其根部培养基得幼苗，将所述幼苗移栽到基质中培养30天，再将其移栽到大田培养，所述基质，其包括：第一基质层，其由15‑20重量份稻壳、10‑12重量份锯末、5‑8重量份草木灰和5‑8重量份珍珠岩经高温灭菌制得，其厚度为4‑8cm；第二基质层，其位于所述第一基质层上方，其由20‑25重量份黄壤土、15‑20重量份废蜜液、10‑15重量份豆渣、10‑15重量份秸秆、5‑10重量份厩肥和0.3‑0.5份酵素菌经发酵制得，其厚度为5‑10cm；第三基质层，其位于所述第二基质层上方，其为厚度为1‑2cm的细沙层。