一种利用重组大肠杆菌厌氧生产5‑氨基乙酰丙酸的方法

摘要

本发明公开了一种利用重组大肠杆菌厌氧发酵生产5‑氨基乙酰丙酸的方法，是将重组大肠杆菌接种于AM1‑酵母粉无机盐培养基中，先在好氧条件下培养8～15h生长菌体，然后转厌氧发酵，发酵时间为72±10h。本发明方法无需添加昂贵的琥珀酸前体即可通过厌氧发酵生产5‑氨基乙酰丙酸，且生产的5‑ALA不易被降解，简化了工艺，降低了成本。实验证实在厌氧发酵条件下本发明5‑ALA的产量最高达1.65g/l，5‑ALA/葡萄糖转化率为0.32g/g，提示具有很好的工业开发和应用前景。

主权项

一种利用重组大肠杆菌厌氧发酵生产5‑氨基乙酰丙酸的方法，是利用任何能表达5‑氨基乙酰丙酸合成酶和琥珀酰辅酶A合成酶并在厌氧条件下产生琥珀酸的重组大肠杆菌菌株厌氧发酵生产5‑氨基乙酰丙酸，其特征在于：利用所述重组大肠杆菌厌氧发酵生产5‑氨基乙酰丙酸的发酵条件为：以体积百分比计为2％～5％的接种量将重组大肠杆菌接种于AM1‑酵母粉无机盐培养基中，先在好氧条件下培养12h，转速为250±10rpm生长菌体，然后转厌氧发酵，温度均控制为37±1℃，pH均控制为6.5±0.5，发酵时间为72±10h；其中，所述重组大肠杆菌是大肠杆菌YL106‑hemA‑sucCD，其基因型为MG1655ΔptsG ΔpoxB Δpta ΔiclR ΔsdhA ΔarcA ΔldhA ΔadhE pckA*glf_ZM/pTrc99a‑hemA‑sucCD。