一种检测HLA‑B*5801等位基因的TaqMan探针实时荧光PCR方法

摘要

本发明在使用TaqMan探针检测法的基础上，设计了高特异性扩增HLA‑B*5801等位基因的引物探针组合：上游引物Fp：5’‐AGGGGCCGGAGTATTGGGATG‐3’下游引物Rp:5’‐TTGGCCTCAACTGAAAATGAAAC‐3’探针probe：5’‐HEX‐TCAGGGAGGCGGATCTCGGAC–BHQ2‐3’；同时使用内参基因ACTB的引物及探针，将目的基因与内参基因加入一管中进行双通道荧光定量PCR反应，通过扩增曲线分析结果。本发明具有简便、灵活快速、特异性高、高通量、无污染、分辨率高等特点，适用于人体外周血、唾液中全基因组DNA样本的HLA‑B*5801等位基因的检测。

主权项

用于荧光PCR反应高特异性扩增HLA‑B*5801等位基因的特异性引物探针组合，为：上游引物Fp：5’‐AGGGGCCGGAGTATTGGGATG‐3’下游引物Rp:5’‐TTGGCCTCAACTGAAAATGAAAC‐3’探针probe：5’‐HEX‐TCAGGGAGGCGGATCTCGGAC–BHQ2‐3’其中，HEX为6‑carboxy‑hexachlorofluorescein；BHQ2为Black Hole Quencher‑2。