发明名称 一种快速检测鲜乳中沙门氏菌的方法
摘要 一种快速检测鲜乳中沙门氏菌的方法,属于微生物检测技术领域,包括以下步骤:将鲜乳样品加入到缓冲液中得到鲜乳混合液,所述缓冲液中含有去除蛋白质和脂肪的试剂;对鲜乳混合液进行滤纸过滤,取滤液进行微孔滤膜抽滤;将过滤后的微孔滤膜剪碎,添加四硫磺酸钠煌绿增菌液和磷酸盐缓冲液进行冲洗浸泡,得到菌悬液;向菌悬液中添加沙门氏菌免疫磁珠进行混合,振荡、静置磁力架上分层,弃上清;取下层溶液,加入磷酸盐缓冲液洗涤,静置磁力架上分层,弃上清,得到浓缩待测液;采用Elisa检测法进行检测即可。本发明方法检测鲜乳中沙门氏菌的时间总共约为50min,与国标方法相比,检测时间大大缩短。
申请公布号 CN104726534B 申请公布日期 2017.04.19
申请号 CN201510195909.1 申请日期 2015.04.23
申请人 河南省商业科学研究所有限责任公司 发明人 王法云;朱海华;王雪竹;尹红娜;周莉;章建军;谭静;平洋;王永;王慧
分类号 C12Q1/10(2006.01)I;G01N33/569(2006.01)I;C12R1/42(2006.01)N 主分类号 C12Q1/10(2006.01)I
代理机构 郑州立格知识产权代理有限公司 41126 代理人 涂连梅
主权项 一种快速检测鲜乳中沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将鲜乳样品加入到缓冲液中得到鲜乳混合液,所述缓冲液中含有去除蛋白质和脂肪的试剂;2)对鲜乳混合液进行滤纸过滤,取滤液进行微孔滤膜抽滤;3)将步骤2)中过滤后的微孔滤膜剪碎,添加四硫磺酸钠煌绿增菌液和磷酸盐缓冲液进行冲洗浸泡,得到菌悬液;4)向菌悬液中添加沙门氏菌免疫磁珠进行混合,振荡、静置磁力架上分层,弃上清;5)取下层溶液,加入磷酸盐缓冲液洗涤,静置磁力架上分层,弃上清,得到浓缩待测液;6)采用Elisa检测法进行检测即可;步骤2)中对鲜乳混合液进行滤纸过滤后,取滤液进行离心,收集下清液,微孔滤膜抽滤;所述微孔滤膜孔径为0.22μm;步骤1)中所述试剂为纤维素树脂;步骤1)中所述缓冲液为0.01mol/L磷酸盐缓冲液;步骤3)中所述冲洗浸泡时间≤2min,所述四硫磺酸钠煌绿增菌液和磷酸盐缓冲液体积比为1:1。
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