检测复方大蒜油胶囊中大蒜油含量的方法

摘要

本发明涉及检测复方大蒜油胶囊中大蒜油含量的方法，有效解决复方大蒜油胶囊中的大蒜油含量的检测的问题，制备对照品、供试品1和供试品2溶液，设定色谱条件；吸取对照品溶液进样，计算相对标准偏差，当此偏差小于等于3.0%时，记录大蒜素峰保留时间的区间；吸取供试品1溶液进样，计算相对标准偏差，当此偏差小于等于3.0%时，大蒜素峰面积平均值为标准的供试品1溶液的峰面积；用同供试品1溶液同样方法对供试品2溶液测定，得标准的供试品2溶液的峰面积；计算，即得供试品1中大蒜油的含量；本发明避免检测结果不准确，误差较大，重复性差的缺陷，保证了产品质量的稳定性，大大提高了工作效率。

主权项

一种检测复方大蒜油胶囊中大蒜油含量的方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)、对照品溶液的制备：取标示纯度为94.2％的大蒜素对照品0.01054g，用无水乙醇稀释至50ml，得到浓度为198.57μg/ml的对照品溶液；(2)、供试品1溶液的制备：取复方大蒜油胶囊内容物1.8g作为供试品1，加入80ml无水乙醇，在功率250W，频率50kHz下，超声处理20min，加无水乙醇至100ml，摇匀，过滤，得初滤液，过滤，得续滤液，续滤液即为供试品1溶液；(3)、供试品2溶液的制备：利用挥发油测定器提取复方大蒜油胶囊内容物中的大蒜油，方法是，取20g复方大蒜油胶囊内容物置于挥发油测定器中，加入300ml水与玻璃珠3～5粒，加热至沸腾，再继续蒸馏30分钟，停止加热，放置15分钟，收集0.1001g大蒜油作为供试品2，加入无水乙醇80ml，在功率250W，频率50kHz下，超声处理20min，加无水乙醇至100ml，摇匀，即得供试品2溶液；(4)、色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇‑0.1％甲酸溶液为流动相，检测波长为210nm，柱温为40℃，理论板数按大蒜素峰计算不低于3000，其中，甲醇‑0.1％甲酸溶液是由甲醇和0.1％甲酸溶液以体积比75:25混合制成；所述的0.1％甲酸溶液的制备方法是，取0.5g甲酸，加水稀释至500ml；(5)、测定：A、吸取对照品溶液注入高效液相色谱仪，反复进行5次进样，每次进样量为10μl，分别记录5次进样后所得的对照品溶液的5幅色谱图中大蒜素的峰面积，得出5幅色谱图中大蒜素的峰面积的平均值，代入公式1计算出对照品标准偏差，将计算出的对照品标准偏差代入公式2中计算5幅色谱图中大蒜素的峰面积的相对标准偏差，当相对标准偏差小于等于3.0％时，即可认定此高效液相色谱仪性能稳定，能够完成后续的检测，记录5幅色谱图中大蒜素峰保留时间的区间；公式1：$\alpha =\sqrt{\frac{{\left(X_1-X\right)}^2+{\left(X_2-X\right)}^2+{\left(X_3-X\right)}^2+{\left(X_4-X\right)}^2+{\left(X_5-X\right)}^2}{5-1}}$公式1中，X₁‑‑‑‑第1次进样所得的色谱图中大蒜素的峰面积；X₂‑‑‑‑第2次进样所得的色谱图中大蒜素的峰面积；X₃‑‑‑‑第3次进样所得的色谱图中大蒜素的峰面积；X₄‑‑‑‑第4次进样所得的色谱图中大蒜素的峰面积；X₅‑‑‑‑第5次进样所得的色谱图中大蒜素的峰面积；X‑‑‑‑5次进样所得的5幅色谱图中大蒜素的峰面积的平均值；5‑‑‑‑为进样5次；α‑‑‑‑‑‑‑标准偏差；公式2：RSD＝α÷X×100％其中，RSD‑‑‑‑‑‑‑n次进样所得的n幅色谱图中大蒜素的峰面积的相对标准偏差；X‑‑‑‑‑‑‑n次进样所得的n幅色谱图中大蒜素的峰面积的平均值；上述n为进样的次数；B、吸取供试品1溶液注入高效液相色谱仪，反复进行2次进样，每次进样量为10μl，分别在2次进样后所得的供试品1溶液的2幅色谱图中找出供试品1的大蒜素的色谱峰，供试品1的大蒜素的色谱峰处于A步骤的5幅色谱图中大蒜素峰保留时间的区间内，根据找出的供试品1的大蒜素的色谱峰，分别记录供试品1溶液的2幅色谱图中大蒜素的峰面积，得出2幅色谱图中大蒜素的峰面积的平均值，代入公式3计算出供试品1标准偏差，将计算出的供试品1标准偏差代入公式2中，计算供试品1溶液的2幅色谱图中大蒜素的峰面积的相对标准偏差，当相对标准偏差小于等于3.0％时，即可确定供试品1溶液的2幅色谱图中大蒜素的峰面积的平均值为标准的供试品1溶液的大蒜素的峰面积；公式3：$\alpha =\sqrt{\frac{{\left(X_1-X\right)}^2+{\left(X_2-X\right)}^2}{2-1}}$公式3中，X₁‑‑‑‑第1次进样所得的色谱图中大蒜素的峰面积；X₂‑‑‑‑第2次进样所得的色谱图中大蒜素的峰面积；X‑‑‑‑2次进样所得的2幅色谱图中大蒜素的峰面积的平均值；2‑‑‑‑为进样2次；α‑‑‑‑‑‑‑标准偏差；C、吸取供试品2溶液注入高效液相色谱仪，反复进行2次进样，每次进样量为10μl，分别在2次进样后所得的供试品2溶液的2幅色谱图中找出供试品2的大蒜素的色谱峰，供试品2的大蒜素的色谱峰处于A步骤的5幅色谱图中大蒜素峰保留时间的区间内，根据找出的供试品2的大蒜素的色谱峰，分别记录供试品2溶液的2幅色谱图中大蒜素的峰面积，得出2幅色谱图中大蒜素的峰面积的平均值，代入公式3计算出供试品2标准偏差，将计算出的供试品2标准偏差代入公式2中，计算供试品2溶液的2幅色谱图中大蒜素的峰面积的相对标准偏差，当相对标准偏差小于等于3.0％时，即可确定供试品2溶液的2幅色谱图中大蒜素的峰面积的平均值为标准的供试品2溶液的大蒜素的峰面积；D、将上述B步骤所得的标准的供试品1溶液的大蒜素的峰面积和上述C步骤所得的标准的供试品2溶液的大蒜素的峰面积代入公式4中计算，即得供试品1中大蒜油的含量；公式4如下：$y=\frac{V1}{V2}\times \frac{m2}{m1}\times 100\%$其中：V1‑‑‑‑‑‑‑标准的供试品1溶液的大蒜素的峰面积；V2‑‑‑‑‑‑‑标准的供试品2溶液的大蒜素的峰面积；m1‑‑‑‑‑‑‑供试品1的取样量；m2‑‑‑‑‑‑‑供试品2的取样量；y‑‑‑‑‑‑供试品1中大蒜油的含量。