一种对石油污染土壤进行生物修复的方法

摘要

本发明涉及属于分子生物学技术和污染土壤修复技术交叉领域，具体的说是一种利用广宿主自转移降解质粒对石油污染土壤进行生物修复的方法。将携带含有石油烃降解基因和遗传选择标记的广宿主自转移降解质粒的宿主菌接种到待处理的污染土壤中，并添加营养液，通过微生物间的接合转移作用，使广宿主自转移质粒所携带的降解基因发挥高效降解作用，进而达到持久修复石油烃污染土壤的目的。本发明有别于传统方法中接种降解菌的操作。接种后通过接合转移，广宿主降解质粒转至污染土壤土著菌群，使得降解基因发生水平转移，在具有生长竞争优势的土著细菌中表达并发挥降解功能，避开了接种菌株难以长期存活的“瓶颈”问题，达到持久修复石油烃污染的目的。

主权项

一种利用广宿主自转移降解质粒对石油污染土壤进行生物修复的方法，其特征在于：将携带含有石油烃降解基因和遗传选择标记的广宿主自转移降解质粒的宿主菌接种到待处理的污染土壤中，并添加营养液，通过微生物间的接合转移作用，使广宿主自转移质粒所携带的降解基因发挥高效降解作用，进而达到持久修复石油烃污染土壤的目的：所述遗传选择标记为：抗生素抗性基因、β‑半乳糖苷酶基因(lacZ)或绿色荧光蛋白基因(gfp)；所述石油烃降解基因为：编码芳香环羟化双加氧酶基因(phdA)、甲苯单加氧酶基因(touA)、编码苯双加氧酶基因(ben)、编码甲苯双加氧酶基因(tod)中一种或几种；所述宿主菌为染色体带有利福霉素抗性(RifR)选择标记的变形菌(Proteobacteria)α‑,β‑或γ‑任一亚纲中的菌株。