发明名称 |
一种磷酸化肽的吸附富集方法、添加剂及其应用 |
摘要 |
本申请公开了一种磷酸化肽的吸附富集方法。本申请的吸附富集方法包括:(1)将非特异吸附抑制剂和部分待检样品添加到上样缓冲液,采用富集过滤柱进行磷酸化吸附富集;(2)收集富集产物,计算20种氨基酸在非磷酸化肽中丰度,作第一丰度,计算非磷酸肽所在蛋白质中20种氨基酸的丰度,作第二丰度,第一丰度比第二丰度,选比值较高的至少一种氨基酸为添加剂;(3)采用加入添加剂的上样缓冲液,对待检样品进行磷酸化肽吸附富集。本申请,运用氨基酸与多肽的竞争吸附作用,减小非磷酸化肽的吸附,增加磷酸化多肽富集的吸附选择性,为提高磷酸化检测的准确性和稳定性奠定基础。 |
申请公布号 |
CN104119422B |
申请公布日期 |
2017.04.12 |
申请号 |
CN201410324050.5 |
申请日期 |
2014.07.09 |
申请人 |
深圳华大基因研究院 |
发明人 |
訾金;张朝良;林梁 |
分类号 |
C07K1/22(2006.01)I;G01N1/40(2006.01)I |
主分类号 |
C07K1/22(2006.01)I |
代理机构 |
深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 |
代理人 |
彭家恩;罗瑶 |
主权项 |
一种磷酸化肽的吸附富集方法,包括:(1)将非特异吸附抑制剂添加到上样缓冲液中,同时,将部分待检样品溶于上样缓冲液中,采用富集过滤柱对磷酸化肽进行吸附富集;(2)收集富集后的样品,对其进行分析,计算20种氨基酸在非磷酸化肽中丰度,作为第一丰度,并计算非磷酸肽所在蛋白质中20种氨基酸的丰度作为第二丰度,计算所述第一丰度比第二丰度的比值,选择比值较高的至少一种氨基酸作为添加剂;(3)将步骤(2)所述的添加剂加入到上样缓冲液中,使用加入了添加剂的上样缓冲液,再采用另外一个富集过滤柱对待检样品进行磷酸化肽富集。 |
地址 |
518083 广东省深圳市盐田区北山工业区综合楼 |