微量起始DNA的高通量测序文库构建方法及其所构建的高通量测序文库

摘要

本发明提供了一种微量起始DNA的高通量测序文库构建方法及其所构建的高通量测序文库。该构建方法包括：对样本DNA进行物理打断，得到片段化DNA；对片段化DNA进行末端修复及加A，得到修复DNA；利用连接增强剂对修复DNA进行接头连接，得到带接头片段；以及对带接头片段进行扩增，得到高通量测序文库；连接增强剂为DMSO、乙醇、乙二醇或甘油。通过在接头连接的步骤中添加具有连接增强作用的DMSO、乙醇、乙二醇或甘油等小分子物质，利用这些小分子物质刺激连接酶的活性中心区域来增强连接活性，提高接头连接效率，使更多修复DNA片段连上接头序列，从而提高了微量起始量样本的测序成功率。

主权项

一种微量起始DNA的高通量测序文库构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：步骤S1，对样本DNA进行物理打断，得到片段化DNA；步骤S2，对所述片段化DNA进行末端修复及加A，得到修复DNA；步骤S3，利用连接增强剂对所述修复DNA进行接头连接，得到带接头片段；以及步骤S4，对所述带接头片段进行扩增，得到所述高通量测序文库；其中，所述连接增强剂为DMSO、乙醇、乙二醇或甘油。