一种提高猪细胞重编程能力的方法及应用

摘要

本发明公开了一种提高猪细胞重编程能力的方法及应用，属于细胞移植和胚胎发育技术领域。本发明所提供的方法是在获取并培养猪卵母细胞和猪胎儿成纤维细胞后，进行体细胞核移植，最后进行iPS诱导并进行碱性磷酸酶染色。方法中利用小分子药物GSK126进行了处理，其使用方式有以下三种：1)猪胎儿成纤维细胞在核移植前利用小分子药物GSK126进行处理；2)在猪胎儿成纤维细胞体细胞核移植后，利用小分子药物GSK126处理融合胚胎；3)用于iPS诱导的猪胎儿成纤维细胞，在培养成熟后接种前利用小分子药物GSK126进行处理。本发明所提供的方法可以显著提高克隆胚胎的发育率和iPS诱导效率，提高幅度分别达到44.7％和111.3％。

主权项

一种提高猪细胞重编程能力的方法，是在获取并培养猪卵母细胞和猪胎儿成纤维细胞后，进行体细胞核移植，最后进行iPS诱导并进行碱性磷酸酶染色，其特征在于，以下列任意一种方式使用小分子药物GSK126：1)猪胎儿成纤维细胞在核移植前利用0.5‑3.0μM小分子药物GSK126进行处理40‑50h；2)在猪胎儿成纤维细胞体细胞核移植后，利用0.05‑0.15μM小分子药物GSK126处理融合胚胎18‑30h；3)用于iPS诱导的猪胎儿成纤维细胞，在培养成熟后接种前利用0.5‑3.0μM小分子药物GSK126进行处理40‑50h。