一种体外完成细胞减数分裂的方法

摘要

本发明提供了一种体外完成细胞减数分裂的方法，包括以下步骤：1)将原始生殖细胞或原始生殖细胞样细胞(PGCLCs)与睾丸细胞以1：1的比例混合后在含有减数分裂启动因子的细胞培养基培养至形成细胞集落并检测到减数分裂启动基因表达，得到启动减数分裂的细胞；2)将步骤1)得到的启动减数分裂的细胞转移至含减数分裂维持因子的细胞培养基培养，至检测到单倍体精子细胞特异基因表达，经分选获得单倍体。给干细胞分化技术治疗男性不育应用上临床提供了技术基础。

主权项

一种体外完成细胞减数分裂的方法，所述方法包括以下步骤：1)将原始生殖细胞或原始生殖细胞样细胞(PGCLC)与睾丸细胞以1：1的数量比例混合后，在含有减数分裂启动因子的细胞培养基中共培养至形成细胞集落并且检测到减数分裂启动基因表达，得到启动减数分裂的细胞；2)将步骤1)所述的启动减数分裂的细胞转移至含有减数分裂维持因子的细胞培养基，以维持细胞的减数分裂，至检测到单倍体精子细胞的特异基因表达，经分选获得单倍体；优选地，所述分选是通过流式细胞仪实现的；其中，所述减数分裂启动因子包括视黄酸(RA)、骨形态发生蛋白2(BMP 2),骨形态发生蛋白4(BMP 4),骨形态发生蛋白7(BMP 7)和转化生长因子β家族激活素A(Activin A)；所述减数分裂维持因子包括睾酮、促卵泡激素(FSH)和牛垂体提取物(BPE)。