猪链球菌血清型2型保护性抗原蛋白的专用培养基及应用

摘要

本发明涉及猪链球菌血清型2型保护性抗原蛋白的专用培养基即应用。采用高密度发酵工艺，对供试菌发酵中菌体生长、基质消耗、次级代谢产物、动态平衡及内在规律进行了系统研究，优化了发酵培养基成分、发酵培养条件和发酵工艺。通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验、响应面分析等优化专用培养基，保证供试菌在一定比生长速率下菌体正常生长代谢，得到较高菌体量，又能使猪链球菌血清型2型保护性抗原蛋白的表达量显著提高，满足大规模生产要求。本发明的培养基在发酵终点菌体量可达250g/L，每升发酵液中蛋白表达量可达20.9g，比传统TSB培养基中同类蛋白表达量提高了四倍，发酵成本降低了近50％。

主权项

一种猪链球菌(streptococcus suis)血清型2型的保护性抗原蛋白的专用培养基，其特征在于，所述的培养基通过下列步骤制备得到：按重量/体积计的组分如下：葡萄糖10g/L，KH₂PO₄ 5～15g/L，K₂HPO₄ 1～5g/L，(NH₄)₂SO₄ 1～10g/L，MgSO₄·7H₂O 1～10g/L，EDTA 5～15mg/L，MnSO₄·5H₂O 1～15mg/L，CoCl₂·6H₂O 1～15mg/L，CuSO₄·5H₂O 1～15mg/L，H₃BO₄ 1～15mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 1～15mg/L，ZnCl₂ 1～10mg/L，柠檬酸铁10～200mg/L和生物素1～15mg/L，余量是水。