一种利用聚球藻PCC 7942制备漆酶的方法

摘要

本发明公开了一种利用聚球藻PCC 7942制备漆酶的方法，包括步骤：将S7942 NSIIRA、S7942 NSIILA、aadA、rep‑origin、SLAC五个片段进行PCR扩增后重组，再扩增收获第一菌体，提取质粒作为重组质粒；聚球藻PCC 7942的自然转化：S1、将聚球藻PCC 7942菌落转移至Bg‑11液体培养基中活化培养7天后用作接种液；S2、将接种液添加至新鲜的Bg‑11液体培养基中培养，直至聚球藻PCC 7942菌落中的第二菌体的OD 730达到2.0～2.5，获得第一培养体系；S3、向第一培养体系中加入重组质粒并培养，直至第二菌体的OD 730稳定，获得第二培养体系；S4、将第二培养体系涂布于含有筛选抗性的Bg‑11固体培养基上并培养，直至出现转化子，获得漆酶。根据本发明的方法所获得的漆酶对染料具有良好的降解作用。

主权项

一种利用聚球藻PCC 7942制备漆酶的方法，其特征在于，包括步骤：将S7942NSIIRA、S7942NSIILA、aadA、rep‑origin、SLAC五个片段进行PCR扩增后重组，再进行扩增收获第一菌体，提取所述第一菌体中的质粒，作为重组质粒；聚球藻PCC 7942的自然转化：S1、将聚球藻PCC 7942菌落转移至第一份Bg‑11液体培养基中活化培养7天后用作接种液；S2、将所述接种液添加至第二份Bg‑11液体培养基中培养，直至所述聚球藻PCC 7942菌落中的第二菌体的OD 730达到2.0～2.5，获得第一培养体系；S3、向所述第一培养体系中加入所述重组质粒，在800lux～1000lux的光照条件下培养，直至所述第二菌体的OD 730稳定，获得第二培养体系；S4、将所述第二培养体系涂布于具有第一筛选抗性的Bg‑11固体培养基上，在1500lux～2000lux的光照条件下培养，直至出现转化子，获得所述漆酶。