一种1,4‑丁二磺酸腺苷蛋氨酸的制备方法

摘要

本发明公开了1,4‑丁二磺酸腺苷蛋氨酸的制备方法：将腺苷蛋氨酸产生菌的发酵液酸化、过滤后得湿菌体，干燥，冻融处理，将无机强酸的水溶液和湿菌体混合均匀；将含破壁菌体的酸液于陶瓷膜中过滤，并添加无机强酸的水溶液，收集滤液；将滤液过纳滤膜，得浓缩液A；过中等极性大孔吸附树脂柱，水洗后得流出液B；过H⁺型大孔弱酸性阳离子交换树脂柱，用1,4‑丁二磺酸洗脱H⁺型大孔酸性阳离子交换树脂柱，分布收集并将流出液C合并；将收集液依次过超滤膜和纳滤膜；将浓缩液D和1,4‑丁二磺酸混合，调节1,4‑丁二磺酸与腺苷蛋氨酸比例，干燥后即得。本发明的制备方法操作简单，产品收率较高，色泽白，纯度高。

主权项

一种1,4‑丁二磺酸腺苷蛋氨酸的制备方法，其包括下述步骤：(1)调节腺苷蛋氨酸产生菌的发酵液的pH值至2.5～3.0，过滤后得湿菌体，将所述湿菌体干燥至含水量在5～20wt％后，进行冻融处理，所述冻融处理的方法为：将所述湿菌体于‑20～‑80℃冷冻12～24h，再于20～25℃融化2～4h；所述冻融处理进行的次数为1～3次；将pH值为2～4的无机强酸的水溶液和所述湿菌体混合均匀，于0～10℃下放置1～3h，得含破壁菌体的酸液；其中，所述湿菌体和所述无机强酸的水溶液的体积比为1:3～1:8；(2)在0～10℃下，将所述含破壁菌体的酸液于陶瓷膜中过滤，过滤的同时向所述陶瓷膜中添加pH值为2～4的无机强酸的水溶液，至滤液中的腺苷蛋氨酸的含量在0.05g/L以下，收集所述滤液；其中，所述陶瓷膜的孔径为20～300nm；(3)将所述滤液过纳滤膜，浓缩所述滤液至腺苷蛋氨酸的浓度为4～5g/L，得浓缩液A；所述纳滤膜的截留分子量为100～200；(4)调节所述浓缩液A的pH值至2～5，过中等极性大孔吸附树脂柱，水洗后得流出液B；所述的中等极性大孔吸附树脂柱中的大孔吸附树脂为聚苯乙烯‑二乙烯苯树脂；(5)将所述流出液B的pH值调节至4.5～6.0后，过H⁺型大孔弱酸性阳离子交换树脂柱，用水洗脱除盐，用0.01～0.02mol/L的醋酸水溶液洗脱除杂，再用水洗脱除醋酸，用pH值为3～5的1,4‑丁二磺酸洗脱所述的H⁺型大孔弱酸性阳离子交换树脂柱，分布收集并将流出液C合并，得收集液；所述流出液C中腺苷蛋氨酸的HPLC纯度在97％以上；(6)将所述收集液依次过超滤膜和纳滤膜；所述的超滤膜的截留分子量为5000～10000，所述纳滤膜的截留分子量为100～200，得浓缩液D；将所述浓缩液D和1,4‑丁二磺酸混合，调节1,4‑丁二磺酸与腺苷蛋氨酸的摩尔比为1.55～1.65，干燥后即得。