高苯丙氨酸血症相关基因外显子突变的测序文库构建方法

摘要

本发明提供一种快速构建高苯丙氨酸血症相关基因外显子突变测序文库的方法，针对高苯丙氨酸血症两个相关基因PAH和PTS设计了23对PCR引物，以待测样本DNA为模板，进行多重PCR反应，再将反应产物作为模板，以传统PCR方法生成二代测序文库从而完成高通量的深度测序。对二代测序数据的分析可以精确地搜索并确认该疾病在不同患者/携带者中的家族特异性突变标签，评估待测者的患病风险。测序结果显示各个样本对该遗传疾病预测的基因区间覆盖完全，从而达到精确确认基因突变体的测序深度要求。本发明方法与现有的全外显子测序技术相比，具有操作简单，操作周期短，试剂耗材消耗少等优点，可用于样本的大批量测序文库的快速制备和同步检测。

主权项

一种引物组合，其特征在于，含有针对高苯丙氨酸血症两个相关基因PAH和PTS的共23对PCR引物，针对PAH基因的引物共16对，分别为SEQ ID NO:1‑32所示的引物；以及针对PTS基因的引物对共7对，分别为SEQ ID NO:33‑46所示的引物。