一种便携式成像法检测磺胺类药物残留的方法及其用途

摘要

本发明为解决现有技术中磺胺类药物检测中存在的问题，提出了一种新的通过测定磺胺类药物成像的光强度并建立工作曲线从而快速检测和计算磺胺含量的方法。本发明的方法可以准确、经济的测定动物性食品中磺胺类药物的含量，尤其是适用于测定磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺嘧啶及磺胺甲基嘧啶四种磺胺类药物含量，因此本发明同时也提供了一种准确、经济、高效、快捷、便携式测定动物性食品中以上四种磺胺类药物残留的用途。

主权项

一种便携式成像法检测磺胺类药物残留的方法，其特征在于包括以下步骤：步骤A，建立工作曲线方程和工作曲线，步骤A1，选取磺胺类药物标准品，然后用乙腈溶解摇匀并定容制取磺胺标准溶液，然后用吸量管精确吸取不同量的磺胺标准溶液制取梯度浓度的磺胺标准溶液；步骤A2，选取无污染的空白样品，并对空白样品进行匀质化处理，然后准确称取若干份1.0g匀质化的样品分别置于10mL聚四氟乙烯管中，然后向各所述的10mL聚四氟乙烯管中加入步骤A1制取的不同浓度的磺胺标准溶液，制成梯度的不同质量浓度的加标样品；然后将每份制备的不同质量浓度的加标样品混匀静置30min后分别加入浓度为70％的乙腈水溶液，然后分别再加入1.0g无水硫酸铵，震荡、涡旋混匀10min后，再按5000r·min^‑1离心处理10min，最后取每份的上层有机层溶液1.5mL，得到供试品溶液；步骤A3，用微量进样器分别抽取步骤A2制备的各浓度的供试品溶液20μL在硅胶薄层色谱G板上点样，在展开剂中展开并吹干，其中，三氯甲烷与水饱和正丁醇按照体积比3‑5：1.5‑0.5比例配制为展开剂，使用浓度为0.005‑0.02％荧光胺作为显色剂，均匀喷涂在薄层色谱板上，吹干，然后将硅胶薄层色谱G板置于365nm紫外灯箱下检视，并使用相机拍摄黑白照片；步骤A4，使用ImageJ2x软件测定步骤A3中拍摄的黑白照片上的显色斑点的平均光强度，然后以供试品溶液浓度为纵坐标，平均光强度为横坐标，计算工作曲线方程，从而建立工作曲线；步骤B，待测品的磺胺定性检测，步骤B1，待测品的处理，取待测品1‑4g于离心管中，加入浓度为60‑90％乙腈水溶液5‑15mL及1‑3g无水硫酸铵，然后震荡、涡旋混匀10min，再5000r·min^‑1离心处理10min，然后萃取待测品中的磺胺残留，得待测品溶液；步骤B2，待测品的薄层色谱分离成像，将步骤B1中制备的待测品溶液和步骤A1中制取的磺胺标准溶液平行点样于同一块硅胶薄层色谱G板，在展开剂中展开并吹干，其中，三氯甲烷与水饱和正丁醇按照体积比3‑5：1.5‑0.5比例配制为展开剂，使用浓度为0.005‑0.02％荧光胺作为显色剂，均匀喷涂在薄层色谱板上，吹干，然后将硅胶薄层色谱G板置于365nm紫外灯箱下检视，并使用相机拍摄黑白照片；步骤B3，待测品的磺胺定性，步骤B2中拍摄的黑白照片中磺胺标准溶液为显色斑点，待测品溶液在其其展开的相应位置如果出现显色斑点，则说明检测出待测品中含有磺胺；步骤C，待测品的磺胺定量检测若步骤B2拍摄的黑白照片中待测品溶液在其其展开的相应位置出现显色斑点，则使用ImageJ2x软件测定其显色斑点的平均光强度，然后将测定的待测品显色斑点的平均光强度代入步骤A4建立的工作曲线方程计算出待测品中的磺胺含量。