猪脑蛋白抗氧化肽的制备方法

摘要

本发明公开了一种猪脑蛋白抗氧化肽的制备方法，其包括以下步骤：步骤一，预处理：取新鲜猪脑制得脱脂脑蛋白粉备用；步骤二、超声波处理猪脑蛋白粉：取脱脂脑蛋白粉按照体积比为1:200的比例加入去离子水，使脑蛋白粉完全溶解；逆流脉冲超声波处理：将冷却至室温的脑蛋白粉置于逆流脉冲超声波处理器中处理，其中，超声频率为20kHz，功率为60‑100W，超声4‑6min，期间超声时间2s，间歇时间2s；步骤三，酶解提取粗猪脑多肽，制得猪脑多肽粗提液；步骤四，分离采用截留分子量为3‑5kDa的超滤膜进行分级分离；步骤五，纯化：利用DEAE‑52纤维树脂层析柱对步骤四制备的猪脑多肽进行二次纯化；制得猪脑蛋白抗氧化肽。

主权项

一种猪脑蛋白抗氧化肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，预处理：取新鲜猪脑冲洗，切碎，经过脱脂、干燥并研磨成粉，制得脱脂脑蛋白粉备用；步骤二、超声波处理猪脑蛋白粉：取步骤一制得的脱脂脑蛋白粉按照体积比为1:200的比例加入去离子水，磁力搅拌20‑40min，置于40‑60℃水浴中保温0.5‑1.5h，使脑蛋白粉完全溶解；逆流脉冲超声波处理：将冷却至室温的脑蛋白粉置于逆流脉冲超声波处理器中处理，其中，超声频率为20kHz，功率为60‑100W，超声4‑6min，期间超声时间2s，间歇时间2s；步骤三，酶解提取粗猪脑多肽：超声后的猪脑蛋白溶液加入碱性蛋白酶进行酶解，其中酶底比为1000‑3000U/g；pH值为8.0‑9.0，酶解温度为30‑50℃，酶解时间为80‑100min；酶解后立即将酶解液置于沸水浴中静置5‑15min；待冷却至室温，于8000‑12000rpm离心10‑20min，取上清液，制得猪脑多肽粗提液；步骤四，分离：将超声辅助酶解得到的猪脑多肽粗提液，采用截留分子量为3‑5kDa的超滤膜进行分级分离，收集所得产物冷冻干燥后制得猪脑多肽，其中，控制超滤膜出口压力小于5Bar；步骤五，纯化：利用DEAE‑52纤维树脂层析柱对步骤四制备的猪脑多肽进行二次纯化；制得猪脑蛋白抗氧化肽。