一种人类IgG浓度的检测方法

摘要

本发明公开了一种人类IgG浓度的检测方法，该方法是以介孔NH₂—二氧化硅纳米粒子为载体先构建一抗—IgG—(二抗—MSN—酶复合物)三层夹心式结构；再利用所述三层夹心式结构催化葡萄糖氧化分解产生过氧化氢，而过氧化氢氧化Fe²⁺生成Fe³⁺及邻二氮菲与亚铁离子形成橙红色络合物的原理，实现人类IgG浓度的检测，该方法具有选择性好、灵敏度高、检测限低，且检测范围宽等优点。

主权项

一种人类IgG浓度的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：1)在介孔NH₂—二氧化硅纳米粒子载体上同时修饰葡萄糖氧化酶和二抗Ab₂，得到二抗—MSN—酶复合物；2)将一抗Ab₁修饰在酶标板的各孔内，再以乙醇胺溶液对酶标板进行封闭，得到一抗Ab₁修饰的酶标板；3)取一系列不同浓度的标准IgG溶液分别加入至所述一抗Ab₁修饰的酶标板的各孔内进行IgG与一抗Ab₁之间的特异性结合反应，得到结合了IgG的酶标板；4)将所述二抗—MSN—酶复合物加入至结合了IgG的酶标板的各孔内进行IgG与二抗Ab₂之间的特异性结合反应，得到含一抗—IgG—(二抗—MSN—酶复合物)三层夹心式结构的酶标板；5)向含一抗—IgG—(二抗—MSN—酶复合物)三层夹心式结构的酶标板的各孔内加入葡萄糖/Fe²⁺混合溶液进行反应后，再加入邻二氮菲显色，并检测各孔内溶液的吸光度值；6)根据检测得到的各孔内溶液吸光度值与对应的标准IgG溶液浓度建立标准曲线；7)取待测IgG溶液替换标准IgG溶液按3)、4)和5)的步骤进行操作，检测得到吸光度值，依据标准曲线，即得待测IgG溶液的浓度。