一种野生环柄菇人工驯化栽培的方法

摘要

本发明公开一种野生环柄菇人工驯化栽培的方法。通过野生环柄菇子实体组织分离获得环柄菇菌丝体，在母种（PDA或PSA）培养基上进行菌丝体培养和一级种扩繁，在麦粒培养基上进行二级种和三级种的制备，采用发酵料床式覆土栽培方式进行出菇。利用该栽培技术可以成功实现野生环柄菇的人工代料栽培和出菇，菌丝体在母种培养基和麦粒培养基上能够正常生长，且菌丝长势好，浓密，子实体能够正常现蕾、发育和成熟，其形态特征和口感也与野生环柄菇相似，获得类似野生环柄菇的营养、外形特征和口感，具有广泛的应用价值。

主权项

一种野生环柄菇人工驯化栽培的方法，其特征在于，所述的方法具体步骤如下：(1)野生环柄菇子实体组织分离：在无菌微环境中将野生环柄菇的子实体沿菌盖和菌柄纵向掰开，然后用灭过菌的镊子迅速从子实体菌盖和菌柄交界处取出黄豆粒大小的子实体菌肉组织接种到常规PDA培养基斜面上，25℃恒温暗培养7d‑10d；然后对菌丝进行纯化培养，方法为，从菌落边缘挑取尖端菌丝体，移植到常规PDA培养基斜面上，25℃恒温暗培养至菌丝长满整个斜面，如此重复3次即可；(2)一级种扩繁：将上述步骤分离筛选保藏的菌种转管扩繁至PDA培养基斜面上，置25℃恒温暗培养至菌丝长满整个培养基斜面，备用；(3)二级种、三级种的制备：将扩繁好的一级种转接至常规麦粒培养基中，置温度25℃，湿度60％的黑暗环境进行培养，至菌丝长满整个麦粒培养基后称为二级种；再将二级种转接到常规麦粒培养基中，置温度25℃，湿度60％的黑暗环境进行培养，至菌丝长满整个麦粒培养基后称为三级种；(4)发酵料床式覆土栽培：发酵料培养基配方为，棉籽壳2000㎏、干牛粪1750㎏、尿素25㎏、碳酸钙20㎏、石膏50㎏、过磷酸钙50㎏、油渣20㎏和石灰50㎏；建堆采用，先在地面上铺一层20cm‑25cm厚预湿好的棉籽壳，在棉籽壳上撒一层干牛粪、过磷酸钙、尿素、油渣、石灰，其上再铺20cm‑25cm厚的棉籽壳，再撒一层干牛粪、过磷酸钙、尿素、油渣、石灰，依次逐渐上堆，当堆至第三、六、十层棉籽壳时，均匀淋水，至堆底有少量水溢出为止；建好的发酵培养料堆宽250cm‑350cm，高150cm‑180cm，长度不限，在建好的发酵料堆顶部覆盖1‑2层塑料薄膜以利于保湿；翻堆：采用每次翻堆需把下面的发酵培养料翻到上面，四周翻到中间，中间翻到外边，把干料和湿料充分拌和均匀，促使培养料发酵均匀一致，同时尽可能将发酵培养料抖松、抖散，排尽其中废气；由于经过发酵，每次翻堆时，发酵培养料堆体积都会缩小，再次建堆时，在不改变堆高、宽的前提下，可缩短堆的长度；第一次翻堆时加入石膏、碳酸钙，用石灰调解酸碱度至pH值7‑8，并浇水调节湿度，第二次翻堆加入石灰调解酸碱度至pH值7‑8，再根据干湿情况适当调节水分；检查发酵培养料含水量：抓一把发酵培养料轻轻一捏，有1‑2滴水滴下为标准，不可太湿或过干；经翻堆4‑5次，培养料发酵结束；发酵好的培养料标准为，培养料颜色呈咖啡色，无氨臭味，培养料中均匀分布有白色高温菌落，质地松软，富有弹性，含水量60％‑65％，pH值7‑8，达到以上标准，发酵培养料即可进棚播种；(5)发酵培养料进棚和菇棚消毒：发酵培养料要趁热进棚，每间菇棚进料要当天完成；铺料厚度要求均匀一致，厚度采用20cm‑30cm；发酵培养料进棚前和进棚后都要对菇棚进行消毒；消毒方法为，密闭菇棚，按每立方米空间用甲醛10ml、高锰酸钾5g进行气化消毒，闷24h后打开门窗，排出甲醛气体，无味时预备播种；(6)播种：播种前应检查栽培发酵培养料中的温度、氨气浓度、料含水量；当栽培发酵培养料温度低于30℃、无氨臭味，含水量达到60‑65％时方可播种；播种时将菌种从菌种瓶中取出稍加揉散呈颗粒状，均匀撒播于栽培发酵培养料表面，用消过毒的木板轻压培养料表面，使菌种与栽培发酵培养料紧密接触，以利菌丝恢复和长入栽培发酵培养料；播种后要及时覆膜，以便保温保湿，以利菌种萌发；(7)菌丝培养：这一时期主要是促进菌丝生长，防止杂菌发生，温度控制在25℃左右，适当通风，每天为料床抖膜1次增氧；播种3d‑5d后菌种萌发成雪花状，及时揭膜，并适当给菇棚通风，5d‑7d后菌丝长入培养料，加大通风量，促使料表干燥，抑制杂菌发生，同时保持新鲜空气，促进菌丝向料纵深生长；播种20d后，菌丝长入培养料内2/3以上至长透培养料时，就可以覆土；(8)覆土：覆土的选择与处理：选用吸水性强，保水性好，不易板结，有适当肥质的中性粘壤土或中壤土为覆土材料；采挖回来的覆土材料要充分暴晒，然后用加有一定浓度福尔马林和施百功的清水将土浸透，盖膜堆闷5d以上，让药物气体充分穿透土层消毒，5d后揭膜，散去农药气味；使用前均匀加入石灰粉，将覆土酸碱度调至pH值7‑8方可使用；(9)出菇管理：出菇期间要求的适宜条件：温度20℃‑28℃，空气相对湿度85％‑95％，培养料含水量65％，覆土含水量22％，空气新鲜；及时清理床面死菇、病菇和发黄的死菇根，注意菇房卫生，预防病虫害发生，结合喷水或追肥，调节酸碱度，喷施0.5％‑1％石灰清液。