发明名称 一种富含谷胱甘肽酵母抽提物中氧化型谷胱甘肽杂质的检测方法
摘要 本发明提供一种富含谷胱甘肽酵母抽提物中氧化型谷胱甘肽杂质的检测方法,本方法利用高效液相色谱仪通过外标法对氧化型谷胱甘肽进行定性、定量检测。本方法利用甲醇/水二元流动相来调控氧化型谷胱甘肽在色谱柱上的保留时间,使得酵母中氧化型谷胱甘肽含量检测准确可信。氧化型谷胱甘肽质量浓度在0.25‑4.00mg/mL之间呈现良好的线性关系;抽提物中氧化型谷胱甘肽杂质最小检测浓度为7μg/mL。本方法操作简单、高效便于检测氧化型谷胱甘肽杂质,为控制富含还原型谷胱甘肽的酵母产品提供了良好的生产质量保障。
申请公布号 CN106526004A 申请公布日期 2017.03.22
申请号 CN201610901698.3 申请日期 2016.10.14
申请人 安琪酵母股份有限公司;三峡大学 发明人 邓张双;李知洪;杜维力;姚鹃;刘秀继;李啸;陈良立;邓艾平;邹坤;龚大春
分类号 G01N30/02(2006.01)I;G01N30/06(2006.01)I;G01N30/34(2006.01)I 主分类号 G01N30/02(2006.01)I
代理机构 宜昌市三峡专利事务所 42103 代理人 蒋悦
主权项 一种富含谷胱甘肽酵母抽提物中氧化型谷胱甘肽杂质的检测方法,其特征在于包括以下步骤:(1)选择对照物质:选择纯度>99.9%的氧化型谷胱甘肽作为对照物质;(2)制备标准品溶液:取氧化型谷胱甘肽标准品80mg,加入去离子水溶解,定容至10mL,摇匀,得到氧化型谷胱甘肽标准储备液,再依次配制成4mg/mL、2mg/mL、1mg/mL、0.5mg/mL和0.25mg/mL的储备液;(3)制备供试品溶液:取安琪酵母股份有限公司生产的酵母粉1g,加入10mL去离子水,80℃下提取15分钟,迅速置于冰水中冷却至室温,4000rpm/min下离心10分钟,取上清液,得到供试品溶液;(4)液相色谱测定:分别取氧化型谷胱甘肽标准品溶液注入高效液相色谱仪,记录峰面积,以氧化型谷胱甘肽浓度为横坐标,相应的峰面积为纵坐标进行线性回归分析,制得线性方程,取稀释的供试品溶液注入高效液相色谱仪,取供试品色谱图中出峰时间及峰形与对照品溶液色谱图中氧化型谷胱甘肽的出峰时间及峰形进行比对,判定供试品溶液含有氧化型谷胱甘肽物质,将供试品色谱图中氧化型谷胱甘肽峰面积数值代入线性方程,即可计算出供试品中氧化型谷胱甘肽的含量。
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