发明名称 一种治疗乳腺癌的CAR‑T细胞制剂的制备方法
摘要 本发明公开了一种治疗乳腺癌的CAR‑T细胞制剂的制备方法,包括以下步骤:S1,抽取患者自身的血液,分离出T细胞,选取1‑3mm<sup>3</sup>的T细胞,放入离心管中,加入1mg/ml的胶原酶浸润,在36‑38℃消化2‑4小时;S2,向S1中离心管加入D‑Hank’s平衡盐溶液冲洗细胞2‑6次,离心力200‑400g,持续6‑8min,获得混合液;S3,将混合液放在培养皿中,并将培养皿放入培养箱内,培养箱内的温度为36‑38℃,含有5‑7%的CO<sup>2</sup>,扩增培养;S4,将慢病毒对S3中培养所得T细胞进行转染并扩增培养,获得CAR‑T细胞;S5,将S4中制备的CAR‑T细胞与人血白蛋白以1:1‑2的比例混匀。本发明成分明确,制作简便,有效降低乳腺癌患者的复发和提高治疗效果,为CAR‑T细胞的临床推广应用提供了更便捷的方法。
申请公布号 CN106511379A 申请公布日期 2017.03.22
申请号 CN201611221435.4 申请日期 2016.12.26
申请人 武汉波睿达生物科技有限公司 发明人 张同存;胡广;顾潮江;柳浥时
分类号 A61K35/17(2015.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61P15/14(2006.01)I;C12N5/0783(2010.01)I 主分类号 A61K35/17(2015.01)I
代理机构 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 代理人 冯子玲
主权项 一种治疗乳腺癌的CAR‑T细胞制剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1,抽取患者自身的血液,分离出T细胞,选取1‑3mm<sup>3</sup>的T细胞,放入离心管中,加入1mg/ml的胶原酶浸润,在36‑38℃消化2‑4小时;S2,向S1中离心管加入D‑Hank’s平衡盐溶液冲洗细胞2‑6次,离心力200‑400g,持续6‑8min,获得混合液;S3,将混合液放在培养皿中,并将培养皿放入培养箱内,培养箱内的温度为36‑38℃,含有5‑7%的CO<sup>2</sup>,扩增培养;S4,将慢病毒对S3中培养所得T细胞进行转染并扩增培养,获得CAR‑T细胞;S5,将S4中制备的CAR‑T细胞与人血白蛋白以1:1‑2的比例混匀,并加入生理盐水,制成可以治疗乳腺癌的CAR‑T细胞制剂。
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