一种荔枝核的高效液相色谱指纹图谱的建立方法

摘要

一种荔枝核的高效液相色谱指纹图谱的建立方法，涉及一种荔枝核指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱和用途。本发明方法为：一、制备供试品溶液；二、制作指纹图谱，将供试品溶液注入高效液相色谱仪；本发明荔枝核的指纹图谱有15个共有特征峰，这些共有特征峰构成了荔枝核的指纹特征，可作为荔枝核的标准指纹图谱。本发明具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好、易于实现的特点。本发明荔枝核标准指纹图谱的用途是指荔枝核指纹图谱作为标准指纹图谱用于荔枝核药材的真伪、产地和品质的鉴别和质量控制。本发明应用于医药领域。

主权项

一种荔枝核的高效液相色谱指纹图谱的建立方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：一、供试品溶液的制备：a、取荔枝核药材，用粉碎机将其粉碎，加5倍质量的质量百分浓度为95％乙醇，浸泡10～12h，超声20～30min，过滤，分别收集固相物A和液相物A，将固相物A加入5倍质量的质量百分浓度为95％乙醇中浸泡2～3h，超声20～30min，过滤，收集液相物B，然后将液相物A和B混合，得到浸提液，将浸提液减压浓缩得浸膏；b、将浸膏用少量蒸馏水溶解后上到大孔树脂色谱柱上，先用蒸馏水洗涤4个柱体积，再用质量浓度为30％的乙醇洗脱4个柱体积，收集洗脱液，然后减压浓缩洗脱液至干，得到干燥固体C；c、将步骤b得到的干燥固体C，用色谱甲醇溶解成浓度为2mg/mL的溶液，用微孔滤膜进行过滤，滤液即为供试品溶液；二、指纹图谱的制作：将步骤一得到的供试品溶液注入高效液相色谱仪，以体积比为9:1的甲醇和乙腈的混合溶液为A相，以体积比为0.2:100的磷酸和水的混合液为B相进行梯度洗脱；其中，高效液相色谱条件为：色谱柱填料Thermo C18，规格为250×4.6mm，5μm；柱温为35℃；流速0.8mL/min，检测波长280nm，进样量10μL；在此条件下分析供试品溶液，得到荔枝核的指纹图谱；其中步骤二中梯度洗脱顺序为：0min→20min→40min→45min→50min，体积比为9:1的甲醇和乙腈混合溶液15％→20％→30％→35％→50％。