特异探测膀胱癌细胞的分子遗传装置

摘要

本发明公开了一种特异探测膀胱癌细胞的分子遗传装置，包括：质粒hUPII‑pSpCas9、质粒hTERT‑gRNA‑BAM、质粒pRL‑SV40‑LacI、质粒pcDNA3‑LacO‑hRluc和质粒pcDNA3‑LacO‑E‑cadherin。本发明的分子遗传装置能够有效特异控制膀胱癌细胞并显著影响其恶性生物学行为，并能够有效检测膀胱癌细胞并增强荧光素酶基因的表达，便于科学研究。

主权项

一种特异探测膀胱癌细胞的分子遗传装置，其特征在于，包括：质粒hUPII‑pSpCas9 ；质粒hTERT‑gRNA‑BAM；质粒pRL‑SV40‑LacI；质粒pcDNA3‑LacO‑hRluc；质粒pcDNA3‑LacO‑E‑cadherin；将hUPII启动子片段插入质粒Cbh‑3X‑FLAG‑NLS‑SpCas9‑NLS的XbaI /AgeI位点，而构建所述质粒hUPII‑pSpCas9 ；将hTERT启动子和核酸酶序列围绕的引导RNA分子分别插入质粒 pCMVp‑NEO‑BAM的XbaI/ Sal I 和 Sal I/ BamH I位点，而构建所述质粒hTERT‑gRNA‑BAM；将lacI基因序列插入质粒pRL‑SV40的NheI / XbaI位点，而构建所述质粒pRL‑SV40‑LacI；将lac 操纵子序列和 hRluc基因分别插入质粒pcDNA3 的Hind III/ Kpn I 和 BamH I / EcoR I位点，而构建所述质粒pcDNA3‑LacO‑hRluc；将人E‑cadherin cDNA 序列插入pcDNA3‑LacO‑hRluc的BamH I / EcoR I位 点，而构建所述质粒pcDNA3‑LacO‑E‑cadherin。