一种猪胚成纤维细胞的制备方法

摘要

本发明涉及一种猪胚成纤维细胞的制备方法，以严格的步骤来制备猪胚成纤维细胞，本发明的有益成果是：本发明扩增了猪胚成纤维细胞，通过完善的实验步骤对整个制备过程进行限定，并严格规定其中的参数，使制备方法的结果更加完善。

主权项

一种猪胚成纤维细胞的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：取38℃孵化至1‑2年的猪胚，碘酒消毒8分钟，酒精脱碘后，无菌操作分离胚体，用无菌的D‑Hank’s液轻轻洗涤8次，加入3～8ml的0.28％胰酶，于37℃的温度下，消化20～30分钟，消化过程中轻轻吹打数次，以使消化后的胚体尽量地分散单个细胞，然后用台盼蓝进行活细胞计数，按照480～500万细胞/瓶的浓度分装于100ml细胞培养瓶中，置于37℃的8％浓度的二氧化碳培养箱中，待细胞长成单层后以备接种，所述猪胚的细胞生长液为含5％犊牛血清、3ul/ml两性霉素、青霉素和链霉素混合而成。