一种选择性富集和鉴定N-连接糖肽的方法

摘要

本发明涉及一种基于氨基和醛基的还原胺化反应的选择性富集和鉴定生物样品中N-糖基化位点的方法及其在N-糖蛋白质组分析中的应用。首先，取含糖蛋白的生物样品一份，用胰蛋白酶Trypsin酶解，并用甲醛封闭肽段的末端氨基和侧链氨基，然后用高碘酸钠溶液氧化糖肽上的糖链生成醛基，之后利用氨基微球富集氧化后的糖肽并用肽糖苷酶PNGase F处理，最后对释放的N-糖肽进行质谱分析，以得到样品中的N-糖蛋白质组信息。本方法可用于糖基化蛋白质组学分析，能同时获取相应的糖蛋白、糖肽和糖基化位点的鉴定结果。本方法对于鉴定糖蛋白上N-糖基化位点简便，高效，高通量。

主权项

一种选择性富集和鉴定N‑连接糖肽的方法，其特征在于：首先，取生物样品，用胰蛋白酶Trypsin酶解，并用甲醛封闭肽段的末端氨基和侧链氨基，然后用高碘酸钠溶液氧化糖肽上的糖链生成醛基，之后利用氨基微球富集氧化后的糖肽并用肽糖苷酶PNGase F处理，最后对释放的N‑糖肽进行质谱分析，以得到样品中的N‑糖基化位点，N‑糖肽，及对应的糖蛋白信息。