| 发明名称 | 一种抽提低拷贝质粒的方法 | ||
| 摘要 | 本发明公开了一种抽提低拷贝质粒的方法。一种抽提低拷贝质粒的方法，其特征在于挑取单菌落接种于含有相应抗生素的丰富培养基试管内，于37℃、220rpm，培养14‐17h至生长对数期，将培养的菌液扩大至300ml含有相应抗生素的丰富培养基，37℃、220rpm，培养2.5‐3h至OD600为1.5‐1.7，加入终浓度为150～200μg/ml的氯霉素，于37℃、220rpm诱导培养约14‐20h，然后常规抽提方法进行抽提。所述的常规抽提方法优选碱裂解法。本发明通过氯霉素诱导，大大提高了低拷贝质粒的抽提量，成功降低基因组污染发生概率，提升产品一次通过率。 | ||
| 申请公布号 | CN106480016A | 申请公布日期 | 2017.03.08 |
| 申请号 | CN201610864971.X | 申请日期 | 2016.09.29 |
| 申请人 | 南京金斯瑞生物科技有限公司 | 发明人 | 余鹏飞;王贞贞;曾雪飞;李胜华;徐士军;卢圣东;闵静;吴其根;梁艳 |
| 分类号 | C12N15/10(2006.01)I | 主分类号 | C12N15/10(2006.01)I |
| 代理机构 | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人 | 傅婷婷;夏平 |
| 主权项 | 一种抽提低拷贝质粒的方法，其特征在于挑取单菌落接种于3‐6ml含有相应抗生素的丰富培养基试管内，于37℃、220rpm，培养14‐17h至生长对数期，将培养的菌液扩大至300ml含有相应抗生素的丰富培养基，37℃、220rpm，培养2.5‐3h至OD600为1.5‐1.7，加入终浓度为150～200μg/ml的氯霉素，于37℃、220rpm诱导培养约14‐20h，然后常规抽提方法进行抽提。 | ||
| 地址 | 211100 江苏省南京市江宁区科学园雍熙路28号（紫金方山） | ||