发明名称 | 一种适用于两栖、爬行类物种的骨切片制备方法 | ||
摘要 | 本发明涉及适用于两栖、爬行类物种的骨切片制备方法,该方法包括以下步骤:⑴取样:骨骼样品于中性甲醛溶液中常温下固定后流水冲洗;⑵脱钙:将冲洗好的骨骼样品去除皮肤和肌肉组织,并放入硝酸溶液中脱钙、流水冲洗;⑶在预冷的载物台表面涂布一层合成胶水,冷冻后备用;⑷包埋:将脱钙后的骨骼样品先置于合成胶水中浸泡,然后放到载物台上冷冻的合成胶水表面,冷冻后再次滴加合成胶水冷冻彻底包埋;⑸切片:将所得的包埋好骨骼样品的胶水块切片、贴片、晾干,得到晾干的片子;⑹晾干的片子染色;⑺冲洗蓝化结束后,迅速滴加一滴甘油封片,即得骨切片。本发明操作简便、成本低廉,适合于推广和应用实验教学的脱钙冰冻骨切片实验方法。 | ||
申请公布号 | CN106482997A | 申请公布日期 | 2017.03.08 |
申请号 | CN201611012522.9 | 申请日期 | 2016.11.17 |
申请人 | 兰州大学 | 发明人 | 马明;盛英卓;陈强;唐晓龙 |
分类号 | G01N1/28(2006.01)I | 主分类号 | G01N1/28(2006.01)I |
代理机构 | 兰州中科华西专利代理有限公司 62002 | 代理人 | 李艳华 |
主权项 | 一种适用于两栖、爬行类物种的骨切片制备方法,包括以下步骤:⑴取样:取骨骼样品置于中性甲醛溶液中,常温下固定24~48小时后流水冲洗12小时,去除残留固定液;⑵脱钙:将所述步骤⑴冲洗好的骨骼样品去除皮肤和肌肉组织,并放入质量浓度为5%的硝酸溶液中脱钙12~24小时,再流水冲洗12小时去酸,得到脱钙后的骨骼样品;⑶在预冷的载物台表面涂布一层合成胶水,‑20℃冷冻后备用;⑷包埋:将所述脱钙后的骨骼样品置于合成胶水中浸泡5min,得到胶水浸润的骨骼样品;将所述步骤⑶所得的冷冻好的载物台置于体视镜下,用常温镊子粘着去除多余合成胶水的所述胶水浸润的骨骼样品,放到载物台上冷冻的合成胶水表面,因遇冷初步凝固,然后放入‑20℃冰箱进一步冷冻后再次滴加合成胶水冷冻彻底包埋;⑸切片:先将冰冻切片机于‑20℃预冷,然后将所述步骤⑷所得的包埋好骨骼样品的胶水块用刀片修成5mm×5mm的正方形,然后固定到冰冻切片机上匀速切出厚度为12~18μm的连续条带,再用常温载玻片贴片后自然晾干,得到晾干的片子;⑹滴加Ehrlich苏木精染液到所述晾干的片子上,以染液浸没材料为准,染色10~15min后,自来水缓慢冲洗15s;⑺冲洗蓝化结束后,迅速滴加一滴甘油封片,即得骨切片。 | ||
地址 | 730000 甘肃省兰州市城关区天水南路222号 |