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一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法,具体步骤如下:(1)原料预处理:将新鲜或冷冻的小叶女贞果皮和果肉打浆,制得果浆;(2)浸提液制备:向果浆中加入质量分数60%~80%的酸化的乙醇溶液,果浆与酸化的乙醇溶液的质量比为1:5~8,进行提取,提取后将浸提液与果渣分离;再向所得的果渣中加入质量分数60%~80%的酸化的乙醇溶液,果渣与酸化的乙醇溶液的质量比为1:5~8,进行提取,提取后将浸提液与果渣分离;合并两次浸提液;每次提取的温度为25~40℃,提取时间的为10~15小时;(3)粗提液制备:将步骤(2)得到的浸提液在温度45~55℃、真空度在‑0.08~‑0.1MPa条件下进行减压浓缩,减压浓缩比为5~10,回收乙醇,得小叶女贞果花青素粗提液;(4)花青素萃取液制备:将步骤(3)得到的小叶女贞果花青素粗提液与乙酸乙酯按体积比1:1~3混合,充分振荡混匀后进行第一次萃取,收集下层水溶液;再将下层水溶液与乙酸乙酯按体积比1:1~3混合,充分振荡混匀后进行第二次萃取,收集下层水溶液;每次萃取时间为2~4小时,萃取温度为25~30℃,萃取次数为2~4次,最后得花青素萃取液;通过萃取除去黄酮类、脂溶性的蛋白、多糖、色素杂质;(5)大孔树脂柱纯化:将步骤(4)中制得的小叶女贞果花青素萃取液加入到预处理后的大孔树脂柱内,除去糖类、蛋白类、弱极性的黄酮类,上样量为树脂体积的1/6~1/8;再用含0.001wt%~0.01wt%HCl的去离子水以0.5~1BV/h的流速洗脱柱子,用Molish反应不断检测流出液,直至还原糖全部洗脱出去为止;然后用酸化的质量分数25%~35%乙醇溶液以2~3BV/h的流速洗脱柱子,柱温保持在15~20℃,收集洗脱液,将洗脱液在温度45~55℃、真空度在‑0.08~‑0.1MPa条件下减压浓缩,减压浓缩比是5~10,回收乙醇,真空冷冻干燥,制得纯度在30%~40%的小叶女贞果花青素。 |