用于原位合成探针阵列的探针倒转方法

摘要

本公开涉及将原位合成阵列中的寡核苷酸探针倒转的方法。这些方法可用于将探针相对于底物的定向从3’‑结合翻转至5’‑结合。这些方法也可用于减少或消除原位合成阵列中的截短探针序列的存在。

主权项

一种方法，其包括：(a)提供底物；(b)将多个分支接头连接至所述底物，其中所述分支接头包含(i)包含炔的第一分支和(ii)第二分支；(c)将可裂解接头连接至所述第二分支的第一基团；(d)将加帽部分连接至所述第二分支的第二基团；(e)在所述可裂解接头上以3’至5’定向来合成第一寡核苷酸，所述第一寡核苷酸包含(i)经由所述可裂解接头来偶合至所述第二分支的3’末端和(ii)偶合至叠氮化物基团的5’末端；并且(f)通过使所述叠氮化物基团与所述炔反应来环化所述第一寡核苷酸，从而将所述第一寡核苷酸的所述5’末端偶合至所述第一分支中的一个。