发明名称 全基因组甲基化测序文库及其构建方法
摘要 本发明提供了一种全基因组甲基化测序文库及其构建方法。该构建方法包括以下步骤:S1,对全基因组DNA进行片段化,得到DNA片段;S2,采用由dATP、dTTP和dGTP混合形成的dNTP对DNA片段进行末端修复,得到修复片段;S3,对修复片段进行3’末端加“A”,得到3’末端带“A”片段;S4,采用经过“C”到“T”转化处理的接头序列对3’末端带“A”片段进行接头连接,得到带接头片段;S5,对带接头片段进行“C”到“T”转化处理,得到处理片段;S6,对处理片段进行扩增,得到全基因组甲基化测序文库。通过采用不含dCTP的dNTP进行末端修复,避免了非甲基化C的引入,提高了甲基化程度分析的准确性。
申请公布号 CN104532360B 申请公布日期 2017.02.22
申请号 CN201410788846.6 申请日期 2014.12.17
申请人 北京诺禾致源科技股份有限公司 发明人 王苗英;朱海浩;蒋智;李明洲;王大伟;刘运超;曹志生
分类号 C40B50/06(2006.01)I;C40B40/06(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C40B50/06(2006.01)I
代理机构 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 代理人 吴贵明;张永明
主权项 一种全基因组甲基化测序文库的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括以下步骤:S1,对所述全基因组DNA进行片段化,得到DNA片段;S2,采用dATP、dTTP和dGTP混合形成的dNTP对所述DNA片段进行末端修复,得到修复片段;S3,对所述修复片段进行3’末端加“A”,得到3’末端带“A”片段;S4,采用经过“C”到“T”转化处理的接头序列对所述3’末端带“A”片段进行接头连接,得到带接头的片段;S5,对所述带接头片段进行“C”到“T”转化处理,得到处理片段;S6,对所述处理片段进行扩增,得到所述全基因组甲基化测序文库。
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