发明名称 |
在低盐条件下的等温扩增 |
摘要 |
本文提供用于等温核酸扩增的方法和试剂盒,其使用靶向核酸模板;包含具有链替代活性的DNA聚合酶、脱氧核糖核苷三磷酸酯(dNTP)混合物、具有3’端和5’端的引物、分子拥挤剂和缓冲溶液的反应混合物,以便扩增所述靶向核酸模板。所述缓冲溶液维持所述反应混合物的低盐浓度,且其中所述盐浓度产生比反应温度低至少10℃的引物的熔融温度(T<sub>m</sub>)。所述扩增在等温条件下进行。 |
申请公布号 |
CN106460040A |
申请公布日期 |
2017.02.22 |
申请号 |
CN201580015896.3 |
申请日期 |
2015.03.18 |
申请人 |
通用电气公司 |
发明人 |
R.C.赫勒;J.R.尼尔森;P.L.帕特尔;A.M.维克菲尔德;S.J.卡珀 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12P19/34(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
中国专利代理(香港)有限公司 72001 |
代理人 |
徐晶;鲁炜 |
主权项 |
扩增核酸的方法,其包括:a) 提供靶向核酸模板;b) 使所述靶向核酸模板与包含具有链替代活性的DNA聚合酶、脱氧核糖核苷三磷酸酯(dNTP)混合物、具有3’端和5’端的引物、分子拥挤剂和缓冲溶液的反应混合物接触,其中所述缓冲溶液维持所述反应混合物的盐浓度在1mM和75mM之间;和c) 在等温扩增条件下在恒定反应温度下扩增所述靶向核酸模板,其中所述盐浓度使所述引物的熔融温度(T<sub>m</sub>)比所述反应温度低至少10℃。 |
地址 |
美国纽约州 |