高纯度脐带血干细胞的分离方法和试剂盒

摘要

本发明涉及脐带血干细胞的分离方法和试剂盒。其中所述方法包括稀释步骤、沉淀步骤、分层步骤和纯化步骤。其中，稀释步骤中的细胞稀释液为PBS液或0.8‑1.0重量％氯化钠水溶液，沉淀步骤中的细胞沉淀剂为4‑10重量％的羟乙基淀粉水溶液，分层步骤中的细胞分层液为由聚蔗糖和/或泛影葡胺配制成的密度为1.074‑1.076g/ml的水溶液，纯化步骤中的细胞纯化液为由聚蔗糖配制成的密度为1.090‑1.095g/ml的水溶液。通过本发明能够得到具有更高纯度的有效干细胞，杂质细胞更少，在临床应用上具有重要意义。

主权项

一种脐带血干细胞的分离方法，其包括下列步骤：稀释步骤：将脐带血样品与细胞稀释液混合；沉淀步骤：加入沉淀剂，并静置沉降以得到含有干细胞的上层细胞液，将所述含有干细胞的上层细胞液离心浓缩，得到细胞沉淀；分层步骤：将所述细胞沉淀铺在细胞分层液上离心，得到中间云雾状有核细胞；纯化步骤：将所述有核细胞铺在细胞纯化液上离心，得到两条细胞带，取下方细胞带中的细胞即为纯化的干细胞；其中，所述细胞稀释液为PBS液或0.8‑1.0重量％氯化钠水溶液，所述细胞沉淀剂为4‑10重量％的羟乙基淀粉水溶液，所述细胞分层液为由聚蔗糖和/或泛影葡胺配制成的密度为1.074‑1.076g/ml的水溶液，所述细胞纯化液为由聚蔗糖配制成的密度为1.090‑1.095g/ml的水溶液。