一种耐酸互营丙酸产甲烷菌系的驯化方法

摘要

本发明公开了一种耐酸互营丙酸产甲烷菌系的驯化方法，所述耐酸互营丙酸产甲烷菌系包括丙酸氧化细菌群、互营丙酸氧化菌群、乙酸裂解产甲烷菌群、氢营养型产甲烷菌群，该方法以沼气发酵液为接种物，以丙酸为碳源，通过循环阶梯性降低培养基中pH的方法来驯化沼气发酵液来获得耐酸互营丙酸产甲烷菌系，得到的耐酸互营丙酸产甲烷菌系可长期稳定地在pH为6.0‑5.5酸性条件下稳定产气，其产气率为理论产量的60‑65％，丙酸及乙酸的利用率大于90％；具有耐冲击性强，生物强化作用稳定性高等优点，可用于因丙酸积累导致的产气下降或酸败发酵体系，促进丙酸降解及其降解产物产甲烷，提高沼气发酵性能。

主权项

一种耐酸互营丙酸产甲烷菌系的驯化方法，其特征在于，所述耐酸互营丙酸产甲烷菌系包括丙酸氧化细菌群、互营丙酸氧化菌群、乙酸裂解产甲烷菌群、氢营养型产甲烷菌群，该方法以沼气发酵液为接种物，以丙酸为碳源，通过循环阶梯性降低培养基中pH的方法驯化沼气发酵液来获得耐酸互营丙酸产甲烷菌系，该方法包括以下步骤：在氮气和二氧化碳体积比为4:1的混合气氛中，按体积比为19:1‑9:1将接种物接种到丙酸钠浓度为0.7g/L的新鲜培养基中，放入试剂瓶中37℃进行培养，每24h置换新鲜的培养基，10‑15天为一个培养周期，每个循环包括3‑4个培养周期，4个培养周期的pH设置为依次为7.5‑7.0、7.0‑6.5、6.5‑6.0、6.0‑5.5；3个培养周期的pH设置依次为7.5～7.0，7.0～6.5，6.5～6.0；完成一个循环的培养后，再将pH升回7.5‑7.0，进入第二个循环培养，如此循环，直至获得在pH为6.0‑5.5条件下稳定产气的耐酸互营丙酸产甲烷菌系；所述试剂瓶配有带两个孔的橡胶塞，其中一个孔中插有橡胶管至试剂瓶中下部作为进出料的通道，另一个孔连接收集气体的气袋；所述新鲜培养基配制方法为：在1L水中加入0.7g丙酸钠、400mg NH₄Cl、250mg MgSO₄·6H₂O、400mg KCl、120mg CaCl₂·2H₂O、80mg(NH₄)₂HPO₄、55mg FeCl₃·6H₂O、5000mg NaHCO₃，还加入CoCl₂·6H₂O、NiCl₂·6H₂O、MnCl₂·4H₂O、CuCl₂·2H₂O、AlCl₃·6H₂O、ZnCl₂、Na₂WO₄·2H₂O、H₃BO₃、Na₂SeO₃、Ma₂MoO₄·2H₂O各0.0005mg。