基于凝血酶荧光底物金球双标记探针检测乙肝病毒表面抗原的酶联免疫试剂盒制备方法

摘要

本发明涉及基于凝血酶荧光底物金球双标记探针检测乙肝病毒表面抗原的酶联免疫试剂盒制备方法；结合酶联免疫检测和荧光检测两种技术，利用金纳米粒子标记凝血酶和乙肝病毒相应抗体Ab₂制得检测探针。探针、肿瘤标志物和包埋在酶联免疫ELISA试剂盒的另一种乙肝病毒抗体Ab₁通过抗体抗原之间的作用，形成一种类似夹心的结构，通过酶和荧光底物的作用产生荧光，对乙肝病毒表面抗原进行定性定量的检测，建立血液标志物检测方法，提高了检测灵敏度。制备过程简单，适合于产业化生产；根据荧光底物的荧光特性，以及与酶的作用，可定性定量检测蛋白标志物，特异性良好；整个检测过程，成本低廉且操作简便，建立了一种蛋白标志物检测的新方法。

主权项

一种基于凝血酶荧光底物金球双标记探针检测乙肝病毒表面抗原的酶联免疫试剂盒制备方法，其特征是利用金纳米粒子同时标记抗体分子和凝血酶分子制备双标记酶标免疫探针，选用凝血酶荧光底物(p‑tosyl‑Gly‑Pro‑Arg)2‑R110特异性降解产生的荧光对乙肝病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)进行定量检测，其结构式如下：