发明名称 |
一种十八烷基聚乙烯醚双水相萃取螺旋藻藻蓝蛋白的分离技术 |
摘要 |
一种十八烷基聚乙烯醚双水相萃取螺旋藻藻蓝蛋白的分离技术,属于海产品加工分离工程技术领域。本发明步骤为:十八烷基聚乙烯醚的制备;双水相萃取藻蓝蛋白;藻蓝蛋白水溶液经浓缩和冷冻干燥后获得藻蓝蛋白粉;蛋白回收率可达75~87%。该方法简单,对螺旋藻破壁液直接使用十八烷基聚乙烯醚进行富集分离,简化了纯化过程的步骤,选择性高,分离得到的藻蓝蛋白的光谱纯度达到A<sub>620</sub>/A<sub>280</sub>>2.4。原料可采用螺旋藻鲜藻或干藻粉,从而提供了一种解决螺旋藻资源高值规模化利用的技术方法。 |
申请公布号 |
CN106432481A |
申请公布日期 |
2017.02.22 |
申请号 |
CN201611080677.6 |
申请日期 |
2016.11.30 |
申请人 |
江南大学 |
发明人 |
王峰 |
分类号 |
C07K14/795(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I |
主分类号 |
C07K14/795(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种十八烷基聚乙烯醚双水相萃取螺旋藻藻蓝蛋白的分离技术,其特征在于步骤为:十八烷基聚乙烯醚的制备;双水相萃取藻蓝蛋白;藻蓝蛋白水溶液经浓缩和冷冻干燥后获得藻蓝蛋白粉。(1)十八烷基聚乙烯醚的制备:在圆底烧瓶中放入重量百分比为2%~8%的叔丁醇钾苯溶液,在氮气保护下逐滴加入重量百分比为25%~50%的聚乙二醇苯溶液,叔丁醇钾与聚乙二醇的重量比为0.04~0.1:1,在室温下搅拌1~3小时,然后加入重量百分比为15%~30%的十八烷基溴苯溶液,十八烷基溴与聚乙二醇的重量比为0.22~0.5:1,在室温下搅拌反应72~108小时,过滤后将滤液在真空下蒸馏1~3小时获得十八烷基聚乙烯醚。(2)双水相萃取:在螺旋藻破壁清液中加入十八烷基聚乙烯醚和无机盐,十八烷基聚乙烯醚:无机盐:破壁清液的重量比为0.05~0.35:0.25~0.4:1,震荡混合2分钟,静置分相,藻蓝蛋白富集于上相。(3)将上述含藻蓝蛋白的上相经截留分子量为30000道尔顿的超滤膜过滤,去除十八烷基聚乙烯醚和无机盐,获得藻蓝蛋白水溶液,纯度为2.4~4.2,蛋白浓度为4.15~6.6mg/ml。(4)将藻蓝蛋白水溶液在60℃下真空浓缩至原体积三分之一,冷冻干燥后得到藻蓝蛋白粉末。 |
地址 |
214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号 |