一种甘蔗叶片中茉莉酸含量的HPLC检测方法

摘要

本发明公开了一种甘蔗叶片中茉莉酸含量的HPLC检测方法，包括以下步骤：S1.将待测的甘蔗叶片分离出茉莉酸；S2.茉莉酸甲酯化；S3.采用HPLC进行检测。本发明尤其适用于感染梢腐病的甘蔗叶片中茉莉酸含量的测定，能有效排除梢腐病病原菌对检测结果的干扰，为判断甘蔗品种对梢腐病感抗差异研究提供技术支持，从而为甘蔗抗梢腐病育种和茉莉酸介导甘蔗梢腐病病原菌胁迫应答生化机制提供科学有力的技术保证。

主权项

一种甘蔗叶片中茉莉酸含量的HPLC 检测方法，其特征在于包括以下步骤：S1.将丙酮和20~50mmol/L柠檬酸水溶液按体积比5~9:1~5混合制得提取溶剂，冷却至2~5℃，在待测的甘蔗叶片中加入预冷的提取溶剂，再加入液氮，研磨成浆，加入乙酸乙酯，混匀，超声提取20~60min，离心，取上清液，残渣中加入预冷的提取溶剂，超声提取20~60min，离心后取上清液，重复残渣提取和离心操作0~3次，合并上清液，上清液中加入吸附剂，振荡3~10min，离心，取上清液，用氮气吹干水分，获得叶片中的茉莉酸；S2.将步骤S1中获得的茉莉酸，加入甲酯化试剂，混匀，22~25℃下放置20~40min进行甲酯化反应，然后加入酸，混匀，放置20~40min，终止反应，用氮气吹干水分，定容，过滤，作为样品溶液备用；S3.采用HPLC检测样品溶液中茉莉酸的含量。