丝状真菌宿主菌株和DNA构建体以及它们的使用方法

摘要

本发明涉及丝状真菌宿主菌株和用于其产生和使用的重组DNA构建体。所述丝状真菌宿主菌株特别可用于实现重组酶和变体的可靠表达。

主权项

一种丝状真菌宿主细胞表达系统，包含：a.真菌宿主细胞，所述真菌宿主细胞在其染色体DNA中含有非同源重组(NHR)途径的一个或多个组分中的破坏、缺乏第一可选择功能的第一可选择标记、和可有效赋予第二可选择功能的第二可选择标记；和b.核酸分子，所述核酸分子含有(1)当引入所述真菌宿主细胞中时给所述在宿主细胞染色体上的第一可选择标记赋予所述第一可选择功能的序列；(2)可有效表达一种或多种目的基因的序列；(3)和与侧接所述可选择标记的序列具有实质同源性的序列；其中所述同源序列引起同源重组事件，所述同源重组事件导致有功能的第一可选择标记、导致所述第二可选择标记的去除和导致所述目的基因的表达。