发明名称 一种鹿茸多肽在促肾上皮细胞增殖中的应用
摘要 本发明属于生物医药技术领域,本发明公开了一种鹿茸多肽在促肾上皮细胞增殖中的应用。本发明得到含有32个氨基酸的鹿茸多肽对肾上皮细胞(293T)具有增值的作用。所述鹿茸多肽的氨基酸序列为VLSATDKTNVLAAWGKVGGNAPAFGAEALERM。鹿茸多肽在浓度为500ug/ml,作用时间为48h时效果最为显著,有助于促进肾损伤修复。
申请公布号 CN106399227A 申请公布日期 2017.02.15
申请号 CN201610826099.X 申请日期 2016.09.14
申请人 大连理工大学 发明人 张郑瑶;王冉冉;王晓龙
分类号 C12N5/071(2010.01)I;C07K14/47(2006.01)I 主分类号 C12N5/071(2010.01)I
代理机构 大连理工大学专利中心 21200 代理人 梅洪玉
主权项 一种鹿茸多肽在促肾上皮细胞增殖中的应用,其特征在于,包括如下步骤:第一步,细胞培养;培养细胞为肾上皮细胞,使用高糖型培养基,在37℃、5%CO<sub>2</sub>培养箱中进行培养;第二步,细胞消化;取处于对数生长期的肾上皮细胞,进行常规消化,得到单细胞悬液;第三步,离心;将单细胞悬液放入离心管中进行离心;吸去上清液,加入培养基吹打细胞,使细胞分散均匀;第四步,细胞计数;调节细胞个数为5×10<sup>4</sup>~10×10<sup>4</sup>个/ml;第五步,种板;将分散均匀的细胞接种于孔板;孔板每列设置3~6个复孔;在37℃,5%CO<sub>2</sub>培养箱中培养;第六步,加入氨基酸序列VLSATDKTNVLAAWGKVGGNAPAFGAEALERM的鹿茸多肽;当肾上皮细胞处于对数生长期时,向孔板中加入0~500ug/ml的鹿茸多肽;在37℃,5%CO<sub>2</sub>培养箱中培养24~48h;第七步:采用MTT法检测细胞增值情况。
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