一种热稳定突变芳香基硫酸酯酶、基因及其应用

摘要

本发明公开了一种热稳定突变芳香基硫酸酯酶、基因及其应用。利用易错PCR技术引入随机诱变，构建P. carrageenovora芳香基硫酸酯酶突变体库。经过筛选，获得热稳定性提高的突变芳香基硫酸酯酶。结果表明，与WT相比，H260L的热稳定性明显提高。以对硝基苯硫酸钾为底物，H260L的最适反应温度和pH分别为55℃和8.0。H260L在6.0‑9.0的pH范围内稳定。EDTA对突变酶活力有强烈抑制作用，说明金属离子在突变酶的催化过程中起重要作用。H260L对洗涤剂，具有良好的耐受性。H260L对龙须菜粗多糖硫酸基团的脱硫率为82%。本发明也同时获得了含上述突变芳香基硫酸酯酶基因的基因工程菌，实现了酶的异源表达，为该酶的工业化生产和应用提供了良好的基础。

主权项

一种编码突变芳香基硫酸酯酶H260L的基因，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。