发明名称 一种InDel位点基因型分型的方法
摘要 本发明提供了一种InDel位点基因型分型的方法,包括以下步骤:1)将目的基因DNA序列进行T载体克隆测序,得到目的基因克隆产物序列,将所述目的基因克隆产物序列进行多重比对,得到InDel位点;2)根据所述InDel位点设计PCR扩增引物,所述PCR扩增引物包括正向引物和反向引物,所述正向引物的5'末端采用荧光基团修饰;3)用所述PCR扩增引物对待测样本DNA进行PCR扩增获得扩增产物,用毛细管荧光凝胶电泳检测扩增产物确定所述待测样本中InDel位点的基因型。本发明提供的基因型分型方法,成本低、操作简单灵活、结果准确。
申请公布号 CN106399579A 申请公布日期 2017.02.15
申请号 CN201611160425.4 申请日期 2016.12.15
申请人 北京林业大学 发明人 张德强;巩琛锐;杜庆章
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京高沃律师事务所 11569 代理人 王加贵
主权项 一种InDel位点基因型分型的方法,包括以下步骤:1)将目的基因DNA序列进行T载体克隆测序,得到目的基因克隆产物序列,将所述目的基因克隆产物序列进行多重比对,得到InDel位点;2)根据所述InDel位点设计PCR扩增引物,所述PCR扩增引物包括正向引物和反向引物,所述正向引物的5'末端采用荧光基团修饰;3)用所述PCR扩增引物对待测样本全基因组DNA进行PCR扩增获得扩增产物,用毛细管荧光凝胶电泳检测扩增产物,若扩增产物中有两条条带则该InDel位点的基因型为杂合型ID;若有一条条带且片段大小与杂合型ID中大的片段相同,则该InDel位点基因型为插入纯合型II;若有一条条带且片段大小与杂合型ID中小的片段相同,则表示该InDel位点为缺失纯合型DD。
地址 100089 北京市海淀区清华东路35号北京林业大学118信箱