一株表达绿色荧光蛋白（EGFP）基因的人肠道病毒EV71型重组病毒及其应用

摘要

本发明公开了一株表达绿色荧光蛋白(EGFP)基因的人肠道病毒EV71型重组病毒及其应用。本发明在EV71型病毒基因组的3D蛋白编码区后面添加B型肝炎病毒的link序列，而后将EGFP基因连入link与EV71型病毒3’非翻译区之间，从而构成荧光蛋白标记的病毒基因组，该结构不影响病毒翻译后的蛋白加工修饰，产生的EGFP蛋白也不影响子代病毒颗粒组装。转染RD细胞拯救出表达EGFP基因的重组病毒。该病毒能够高效表达EGFP基因，病毒生长曲线与野生病毒株相似，插入的EGFP基因在连续传代过程中较为稳定。该荧光标记病毒株可用于借助酶标仪建立中草药或中草药单体抗病毒的高通量筛选技术(平台)。

主权项

一株表达绿色荧光蛋白基因的人肠道病毒EV71型重组病毒，其特征在于，在EV71型病毒基因组的第7218位碱基后插入link序列，link序列之后插入自带终止密码子TTA的EGFP基因，EGFP序列之后连入EV71型病毒3’端非翻译区。