一种食品及饲料中牛源成分检测侧向流试纸条检测试剂盒及其应用

摘要

本发明公开了在饲料成中牛（Bos taurus）成分的核酸快速检测试剂盒的制备方法及其应用方法，属于分子生物学和免疫学领域。本发明将核酸检测中的聚合酶链式反应的高灵敏度、高特异性方法与免疫学检测中的免疫胶体金快速检测技术相结合，通过设计独特的引物，并对引物进行标记，对提取的靶DNA进行特异性扩增以及扩增产物在展开液中与试纸条上固定的金标记抗体结合而形成稳定、可见的检测带及质控带，从而实现对食品及饲料中牛源成分快速、准确的检测。

主权项

一种食品及饲料中牛源成分的PCR‑免疫胶体金试纸条检测方法，PCR使用的上游引物为：5’‑GCCATATACTCTCCTTGGTGAC‑3’，下游引物为：5’‑TAGTAGGCTTGGGAATAGTACG‑3’，选择生物素分子Biotin、异硫氰酸荧光素FITC或地高辛Digoxin中两种不同的标记对引物的5′端分别进行标记以便于检测，且上下游引物的标记不同；PCR的扩增条件为：95 ℃预变性5 min，94 ℃变性30 sec；55 ℃退火30 sec；72 ℃延伸30sec，扩增30个循环，最后72 ℃ 延伸5 min。