一种红杉组培快繁体系的建立方法

摘要

本发明公开了一种红杉组培快繁体系的建立方法，通过植物组织培养技术短时间内快速获得大量优良木苗的方法。以红杉一年生木质化带芽茎段为外植体，经过启动培养、继代与增殖培养、壮苗与生根培养、炼苗及移栽等过程建立了红杉组培快繁体系，为其规模化生产提供技术支持，并为进一步进行分子育种奠定基础。具有生根多，苗壮、根粗，管理方便，成材快等优点。

主权项

一种红杉组培快繁体系的建立方法，其特征在于包括以下步骤：步骤1，启动培养：选取健壮红杉植株一年生木质化带芽茎段作为外植体，剪去叶片，切成6.0长的带有5个腋芽的节段先用洗衣粉水冲洗4h，再用毛刷刷洗外植体表面将其表面的尘土和部分菌体去除，然后用自来水冲洗4h后置于超净工作台中，先用75%乙醇消毒32s后用无菌水洗6次，再用0.1%升汞溶液消毒26min，用无菌水冲洗8次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后接种到启动培养基进行诱导培养，接种后先在29℃条件下全暗培养8天，然后每天光照9小时，光照强度为3200lx，直至诱导形成丛生芽；步骤2，继代与增殖培养：将步骤（1）培养已萌发的腋芽剪切成带芽的小段并转入增殖培养基上进行继代培养，接种后先在29℃条件下全暗培养5天，然后置于每天光照10小时，光照强度为2200lx，置于培养温度为29℃的条件下培养，多次反复切割进行继代培养，得到萌芽；步骤3，生根培养：将步骤（1）或（2）过程获得的高度约为3.6cm的丛生芽芽分切接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在29℃条件下全暗培养4天，然后每天光照10小时，光照强度为3200lx，培养温度为29℃的条件下培养至生根；步骤4，炼苗移栽：将步骤（3）获得的高约9cm的生根试管苗去瓶盖置于自然光照下炼苗8天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由营养土：沙土＝3:1混合成的基质,置于光照培养箱内培养，每天以1/2MS大量元素营养液给幼苗浇水，保持湿度，待幼苗成活后再移栽大田。