一种提高苦瓜离体胚挽救成苗的方法

摘要

本发明属于生物技术育种技术领域，特别涉及一种提高苦瓜离体胚挽救成苗的方法。一种提高苦瓜离体胚挽救成苗的方法，包括以下步骤：授粉、胚挽救时期、种子培养前处理、接种方式、增殖培养、生根培养、移栽前处理和移栽。本发明的方法可减少嫩种子的愈伤率，使胚挽救时期提前至授粉后第5d。通过暗培养处理使种子处于失绿状态，幼胚周围的液体消失，没有胚部分的种壳变得中空，不跟幼胚争夺养分，且由于失绿而减少愈伤率。

主权项

一种提高苦瓜离体胚挽救成苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)授粉：为远缘杂交授粉或辐射花粉授粉；(2)胚挽救时期：取授粉后第5～10d的果实；(3)种子培养前处理：在无菌条件下，剖开果实取出种子，将种子置于MS培养基中，并于暗培养条件下培养10～15d；(4)接种方式：前处理结束后，切掉大部分种子，保留1/4含胚部分，放入MS培养基中培养，经7～20d光培养后，挑出绿胚并继续放MS培养基中培养，直至胚萌发成苗；(5)增殖培养：将含有子叶、真叶的苗，切掉顶芽并置于MS培养基培养，待子叶的腋芽长出后，切下腋芽继续置于MS培养基中培养；(6)生根培养：将未生根的苗置于生根诱导培养基进行生根诱导，将已生根的苗直接进行移栽前处理；(7)移栽前处理：将已生根的苗炼苗5～7d后，取出生根苗，洗净培养基，栽入基质中，盖膜保温保湿，温度25～30℃，湿度90～95％；(8)移栽：掀开膜后保持基质湿润，喷1次营养液，以叶面不滴水珠为止，待根系发育成侧根发达的根团时，即可移栽定植。