逆转肿瘤多药耐药的基因组合物h‑R3/PAMAM G5/MDR1 siRNA及其应用

摘要

本发明公开了一种能够逆转肿瘤多药耐药的基因组合物‑h‑R3/PAMAM G5/MDR1 siRNA及其制备方法与应用。本发明所提供的抗肿瘤多药耐药基因组合物，由末端为氨基的聚酰胺‑胺树枝状聚合物、靶点为EGFR的尼妥珠单抗h‑R3和针对多药耐药基因MDR1的小干扰RNA自组装制成。本发明具有以下优点：1)以EGFR为靶点，通过自组装的方法形成尼妥珠单抗h‑R3修饰的PAMAM载体作为基因递送载体，利用h‑R3与肿瘤细胞EGFR介导的内吞作用，提高PAMAM载体对肿瘤细胞的靶向性，从而将针对MDR1基因的小干扰RNA成功递送到细胞内，实现目的基因MDR1 siRNA的沉默，进一步增加化疗药物的敏感性。2)采用自组装方法制备h‑R3/PAMAM G5/MDR1 siRNA组合物，与化学合成相比，分子自组装方法可更方便、灵活的对体系进行修饰，并且保持配体的生物活性。

主权项

一种制备抗肿瘤多药耐药组合物的方法，包括如下步骤：将末端为氨基的聚酰胺‑胺树枝状聚合物的水溶液与MDR1siRNA混合后，室温孵育30分钟自组装形成聚酰胺‑胺树枝状聚合物与MDR1siRNA的组合物；再将所述聚酰胺‑胺树枝状聚合物与MDR1siRNA的组合物加入到尼妥珠单抗h‑R3中，室温孵育30分钟自组装形成聚酰胺‑胺树枝状聚合物、尼妥珠单抗h‑R3和MDR1siRNA的组合物，即得到所述的抗肿瘤多药耐药基因组合物；所述聚酰胺‑胺树枝状聚合物的数均分子量为28824.81；所述MDR1siRNA为由序列表中序列1所示的单链正义链和序列表中序列2所示的单链反义链组成；所述聚酰胺‑胺树枝状聚合物与所述MDR1siRNA的氮/磷比为20:1；所述尼妥珠单抗h‑R3与所述MDR1siRNA的质量比为0.05:1、0.1:1或0.5:1。