金花茶皂苷A标准品及其制备方法

摘要

本发明以金花茶叶、枝、花为原料，乙醇‑水为浸提剂，通过超声波浸提、大孔吸附树脂柱吸附、柱层析分离、液相色谱分离等步骤制成金花茶皂苷A标准品。本发明制得的标准品性能稳定，检测精度高，可作为化学对照品，用于金花茶系列产品品质鉴别指标性成分，为质量监督、产品的真伪鉴别提供技术支撑。

主权项

一种金花茶皂苷A标准品的制备方法，其特征在于：将新鲜金花茶原料预处理后，按照金花茶原料：纯净水：复合果浆酶物料比为1:4～6：0.0005进行超声波提取得到金花茶超声波提取液；然后将金花茶超声波提取液浓缩得到金花茶浸膏，湿法上担体进行层析柱分离，收集130～150流分自然挥去溶剂，结晶后得到金花茶皂苷A粗品；最后将金花茶皂苷A粗品用液相色谱进行程序分离纯化得到富含金花茶皂苷A组分纯化液，浓缩、静止结晶、冷冻干燥处理后，即可得到纯度≥98.5%的白色针状的金花茶皂苷A晶体，即金花茶皂苷A标准品；所述的金花茶皂苷A化学名称为：(3β,6α,12β)‑3,6,12‑三羟基达玛烷‑24‑烯‑20‑甲基‑2‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖‑(2→1)‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖‑(2→1)‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖苷，其化学结构式为：该金花茶皂苷A标准品为白色针状晶体；其纯度≥98.5%；溶解性：溶于甲醇、乙醇，微溶于水，不溶于石油醚、氯仿；灰分：≤0.1%；重金属（以pb计）：≤5.0 mg/Kg；水分：≤0.4%；熔点范围：192.3℃～195.6℃；有关物质：≤2.0%；其分子式为：C₄₈H₈₂O₁₈；分子量为：946；所述的层析柱分离选用的层析柱为14㎝×100㎝,担体为200目～300目，用体积比为15～25:2～4氯仿‑甲醇洗脱；所述的液相色谱进行程序分离纯化为将金花茶皂苷A粗品溶解于有机溶剂中制备得到金花茶皂苷A供试液，然后将供试液用液相色谱进行程序分离纯化，所述的程序分离纯化条件为：紫外吸收波长203nm；流动相：A为乙腈，B为水；梯度洗脱条件：0～5 min，A:B体积比为25:75；5～28 min，A:B体积比为40:60；28～37 min，A:B体积比为40:60；37～42 min，A:B体积比为50:50；42～60 min，A:B体积比为50:50；60～65 min，A:B体积比为25:75；65～70 min，A:B体积比为25:75；金花茶皂苷A色谱峰的保留时间为23分钟。