发明名称 基于磁珠和微流控芯片的循环肿瘤干细胞检测试剂盒
摘要 本发明提供了一种基于磁珠和微流控芯片的循环肿瘤干细胞检测试剂盒,其特征在于,包含微流控芯片、至少一种能够与循环肿瘤干细胞特异性结合的标记有肿瘤干细胞生物标志物的免疫磁珠以及至少一种针对肿瘤干细胞生物标志物的荧光抗体,其中,所述的微流控芯片包括玻璃芯片基底,所述的玻璃芯片基底上设有微流控通道,微流控通道内设有软磁性微阵列。本发明可实现一次样品进样即可捕获检测多种不同类别的稀有循环肿瘤干细胞,具有较高的灵敏度和特异性,操作方便快速,捕获细胞易于收集,无需芯片内部微流通道复杂的一抗二抗表面修饰过程等特点。
申请公布号 CN103869060B 申请公布日期 2017.02.01
申请号 CN201410081509.3 申请日期 2014.03.07
申请人 复旦大学附属中山医院 发明人 樊嘉;杨欣荣;孙云帆;徐泱;周俭
分类号 G01N33/533(2006.01)I 主分类号 G01N33/533(2006.01)I
代理机构 上海容慧专利代理事务所(普通合伙) 31287 代理人 于晓菁
主权项 一种基于磁珠和微流控芯片的循环肿瘤干细胞检测试剂盒,其特征在于,包含微流控芯片、能够与循环肿瘤干细胞特异性结合的针对肿瘤干细胞生物标志物EpCAM、CD133、CD90、CD24的免疫磁珠、相应的针对所述肿瘤干细胞生物标志物EpCAM、CD133、CD90、CD24的荧光抗体以及针对白细胞标志物CD45的荧光抗体,其中,所述的微流控芯片包括玻璃芯片基底(1),所述的玻璃芯片基底(1)上设有微流控通道(2),微流控通道(2)内设有软磁性微阵列;所述的软磁性微阵列由镍铁合金圆柱(3)构成,相邻两列镍铁合金圆柱(3)交错排列;其中所述微流控芯片的制备方法为:i)在玻璃基片上溅射Ti/Cu种子层,然后通过正胶光刻得到依据软件模拟设计的软磁性微阵列的阳模,接着进行电铸,获得由镍铁合金圆柱(3)构成的软磁性微阵列;所述的相邻两列镍铁合金圆柱(3)的距离(c)为100μm,镍铁合金圆柱(3)的直径(d)为30μm,每列中相邻两个镍铁合金圆柱(3)之间的距离(e)为50μm;ii)通过化学腐蚀的方法去除Ti/Cu种子层,获得透明的玻璃芯片;接着划片,获得单个玻璃芯片基底(1);iii)通过硅片基底上的SU8胶光刻,获得所需要的微流控通道的阴模,然后通过PDMS快速成型,制备微流控通道(2);iv)最后采用常规方法将微流控通道(2)与玻璃芯片基底(1)进行加压键合,制成微流控芯片。
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