发明名称 海南毒素‑IV类似物rHNIV‑01的表达载体及其制备方法
摘要 本发明提供一种快速、高纯度的制备具有生物活性的重组海南毒素‑IV类似物rHNIV‑01的表达载体及其制备方法。rHNIV‑01与天然海南毒素‑IV(HNTX‑IV)相比,氨基酸序列组成几乎全部一样,仅在C末端没有进行酰胺化修饰。该方法并不使用常规的亲和层析纯化融合蛋白,而是直接在破菌产物中加入蛋白激酶进行切割,接着用三氯乙酸(TCA)抽提法直接将切割产物rHNIV‑01进行选择性的活性抽提,最后使用RP‑HPLC进行纯化。使用该方法能够稳定获得3mg/L的高纯度rHNIV‑01。纯化的rHNIV‑01能够选择性的抑制大鼠DRG细胞上的TTX‑S敏感型钠电流。
申请公布号 CN104099362B 申请公布日期 2017.01.25
申请号 CN201410330373.5 申请日期 2014.07.11
申请人 中国人民解放军国防科学技术大学 发明人 孟尔;张东裔;张辉;鲍邵衡;李文颖;吴磊;朱凌云;柳珑
分类号 C12N15/70(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I 主分类号 C12N15/70(2006.01)I
代理机构 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 代理人 卢宏
主权项 一种海南毒素‑IV类似物rHNIV‑01的表达载体,其特征在于,所述表达载体序列如SEQ ID NO.4所示。
地址 410073 湖南省长沙市开福区砚瓦池正街47号