发明名称 |
海南毒素‑IV类似物rHNIV‑01的表达载体及其制备方法 |
摘要 |
本发明提供一种快速、高纯度的制备具有生物活性的重组海南毒素‑IV类似物rHNIV‑01的表达载体及其制备方法。rHNIV‑01与天然海南毒素‑IV(HNTX‑IV)相比,氨基酸序列组成几乎全部一样,仅在C末端没有进行酰胺化修饰。该方法并不使用常规的亲和层析纯化融合蛋白,而是直接在破菌产物中加入蛋白激酶进行切割,接着用三氯乙酸(TCA)抽提法直接将切割产物rHNIV‑01进行选择性的活性抽提,最后使用RP‑HPLC进行纯化。使用该方法能够稳定获得3mg/L的高纯度rHNIV‑01。纯化的rHNIV‑01能够选择性的抑制大鼠DRG细胞上的TTX‑S敏感型钠电流。 |
申请公布号 |
CN104099362B |
申请公布日期 |
2017.01.25 |
申请号 |
CN201410330373.5 |
申请日期 |
2014.07.11 |
申请人 |
中国人民解放军国防科学技术大学 |
发明人 |
孟尔;张东裔;张辉;鲍邵衡;李文颖;吴磊;朱凌云;柳珑 |
分类号 |
C12N15/70(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/70(2006.01)I |
代理机构 |
长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 |
代理人 |
卢宏 |
主权项 |
一种海南毒素‑IV类似物rHNIV‑01的表达载体,其特征在于,所述表达载体序列如SEQ ID NO.4所示。 |
地址 |
410073 湖南省长沙市开福区砚瓦池正街47号 |