一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法

摘要

本发明提供了一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法。该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX‑6p‑1载体与GyV7病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应，直接重组克隆技术；并转化到大肠杆菌，实现VP3蛋白表达；其中，用于PCR扩增GyV7病毒VP3基因的上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。该方法操作简单、快速高效，获得的GyV7病毒VP3表达及纯化的蛋白，可直接提供VP3蛋白作为GyV7诊断抗原；作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体；为开展GyV7流行病学调查提供有效诊断试剂；并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。

主权项

一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法，其特征在于，该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX‑6p‑1载体与GyV7病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应，直接重组克隆技术；并转化到大肠杆菌，实现VP3蛋白表达；其中，用于PCR扩增GyV7病毒VP3基因的引物分为上、下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。